天然凝胶电泳和变性凝胶电泳异同点
什么是天然凝胶电泳?
在天然凝胶电泳中,目标生物分子(DNA、RNA 或蛋白质)在穿过凝胶时保持其正常或天然结构。 生物分子根据形状和长度进行分离。 因此,在这种电泳中,生物分子根据其天然结构的大小、形状和净电荷进行分离,同时保留其功能和活性。
图1.天然凝胶电泳
DNA、RNA 和蛋白质等生物分子通常带有净负电荷。 具有较高负电荷密度的生物分子将迁移得更快。 此外,与较大的生物分子相比,较小的生物分子将具有较小的摩擦力,因此它们也将迁移得更快。 因此,天然凝胶电泳中的生物分子根据其质量和电荷进行分离。
什么是变性凝胶电泳?
在变性凝胶电泳中,目标生物分子在通过凝胶时不会保持其正常或天然结构。 它根据长度分离生物分子。 变性凝胶电泳破坏了生物分子的复杂结构,因此分子在电泳时仅根据其质量进行分离。
图2.变性凝胶电泳
变性凝胶电泳的一个常见例子是 SDS PAGE(SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳),用于蛋白质分离。 在 SDS PAGE 中,蛋白质样品在阴离子洗涤剂如 SDS(十二烷基硫酸钠)存在下于 100oC 加热。 这种还原剂会破坏蛋白质的二硫键并破坏其蛋白质的四级结构。 SDS 还赋予蛋白质整体负电荷。 该过程使蛋白质能够仅根据其大小或质量进行分离。 SDS PAGE 也可用于确定蛋白质的分子量。
天然凝胶电泳和变性凝胶电泳的相似之处
天然凝胶电泳和变性凝胶电泳是两种不同类型的凝胶电泳技术,用于分离生物分子,例如 DNA、RNA 和蛋白质。
两者都是分子生物学实验室技术。
生物分子的大小可以通过使用两种凝胶电泳技术来确定。
分子梯用于确定两种凝胶电泳技术中生物分子的大小。
天然凝胶电泳和变性凝胶电泳的区别
在变性凝胶电泳中,生物分子在穿过凝胶时保持其正常或天然结构,而在变性凝胶电泳中,生物分子在穿过凝胶时不保持其正常或天然结构。 因此,这是天然凝胶电泳和变性凝胶电泳之间的主要区别。 此外,在天然凝胶电泳中不使用 SDS(十二烷基硫酸钠)和 DTT(二硫苏糖醇)等还原剂,而在凝胶电泳中使用这类还原剂进行变性。