生物化学 药立波 b站视频配套 第二十四章：疾病相关基因的鉴定与基因功能研究

第二十四章：疾病相关基因的鉴定与基因功能研究

第一节：鉴定疾病相关基因的原则

一：鉴定疾病相关基因的关键是确定疾病表型和基因间的实质联系

二：鉴定克隆疾病相关基因需要多学科多途径的综合策略

三：确定候选基因是多克隆疾病相关

第二节：疾病相关基因克隆的策略和方法

一：不依赖染色体定位的基因相关基因克隆策略

（一）从已知蛋白质的功能和结构出发克隆疾病基因

1.依据蛋白质的氨基酸序列信息鉴定克隆疾病相关基因

2.用蛋白质的特异性抗体鉴定疾病基因

（二）从疾病的表型差异出发发现疾病相关基因

1.rda技术使建立在核酸差异杂交基础上的pcr技术

2.Mrna-dd是rt-pcr技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳的结合

（三）采用动物模型鉴定克隆疾病相关基因

二：定位克隆是鉴定疾病相关基因的经典方法

（一）基因定位的方法有多种

1.体细胞杂交法通过融合细胞的筛查定位基因

2.染色体原位杂交是在细胞水平定位基因的常用方法

3.染色体异常有时可提供疾病基因定位的替代疗法

4.连锁分析是定位疾病未知基因的常用方法

（二）定位克隆的基本程序包括三大步骤

1.尽可能缩小染色体上的候选区域

2.构建目的区域的物理图谱

3.疾病相关基因的确定

（三）假肥大型肌营养不良基因的克隆是定位克隆的成功例证

三：确定常见病的基因需要全基因组关联分析和全外显子测序

四：生物信息数据库贮存丰富的疾病相关基因信息

第三节：疾病相关基因的功能研究

一：基因对比及功能诠释

二：利用工程细胞研究基因功能

（一）采用基因重组技术建立基因表达工程细胞系

（二）基因沉默技术抑制特异基因表达

三：研究生物大分子间的相互作用可确定基因功能

四：利用基因修饰动物整体研究基因功能