泛素一靶蛋白的配体PROTAC Linker/三元络合物BTK-PROTAC-E3

蛋白水解靶向嵌合体(Proteolysis Targeting Chimera,PROTAC),利用双功能嵌合体分子同时结合靶蛋白和E3连接酶,使靶蛋白被泛素化标记,从而进入蛋白酶体途径被降解。PROTAC嵌合体分子由三部分组成:结合靶蛋白的配体、结合E3泛素连接酶的配体、以及两者之间的连接链(linker)。

以CDK4/6和EGFR为靶点合成了一系列化合物,从中筛选出降解靶蛋白的PROTAC嵌合体分子。方法:以CDK4/6为弹头的PROTAC嵌合体分子ZM7、ZM8、ZM9分别以梯度稀释浓度处理72h;以Western Blot法检测不同给药时间和浓度条件下ZM7、ZM8、ZM9对靶蛋白CDK4和CDK6的降解作用以及CDK4/6所在信号通路中cyclin D、Rb、phospho-Rb蛋白的表达情况。PROTAC嵌合体分子ZM3、ZM4、ZM5、ZM6分别以梯度稀释浓度处理NSCLC72h,WST-1试剂检测NSCLC;以Western Blot法检测不同给药时间和浓度条件下ZM3、ZM4、ZM5、ZM6对靶蛋白EGFR的降解作用。

结果:ZM7、ZM8、ZM9对T-47D、MCF-7、MDA-MB-468、MDA-MB-231、ZR-75-1以及HAL-01均有增殖作用,且具有浓度依赖性,但对SK-BR-3没有增殖作用;在给药浓度和时间条件下,ZM7、ZM8、ZM9对CDK4和CDK6均没有降解作用。

(2-Pyridyldithio)-PEG4-alcohol、(2-Pyridyldithio)-PEG4-propargyl、(4-Oxo-4H-quinazolin-3-yl)-acetic acid、(4R,5S)-nutlin carboxylic acid、(5,6)TAMRA-PEG3-Azide-PEG3-Desthiobiotin、(±)15-HETE、(Ac)Phe-Lys(Alloc)-PABC-PNP

PAC的 PROTAC-linker偶联物

靶蛋白配体-Linker-E3 配体

烷基链类PROTAC 连接子

烷基/醚类连接子PROTAC分子

PEG 类PROTAC 连接子（4 个单元）合成小分子

PROTAC-抗体偶联物 (PAC) 分子

瑞禧WFF.2022.7