三箱社交行为实验测试方法“白皮书”，5分钟领悟三箱社交行为实验“奥妙”！
实验介绍
社会互动是众多物种生物学的基本和适应性组成部分。社会认可对于定义社会的网络和关系的结构和稳定性至关重要。对于动物，如老鼠，识别同种可能对维持社会等级和配偶选择很重要。
各种神经精神疾病的特征是社会行为和社会认知的破坏，包括抑郁症、自闭症谱系障碍、双相情感障碍、强迫症和精神分裂症。对人类和动物模型（例如，果蝇、线虫、小鼠）的研究已经确定了参与社会行为调节的基因。为了评估动物模型的社交能力，已经开发了几种行为测试。使用动物模型和适当的社会行为测试的综合研究可能会导致改进社会精神病理学治疗的发展。
三箱社交行为测试已成功用于研究几种近交和突变小鼠品系。该测试的主要原则是基于受试者小鼠在两次实验期间自由选择在三个盒子的隔间中的任何一个中花费时间，包括与它不熟悉的一只或两只老鼠的间接接触。为了量化实验小鼠的社会倾向，主要任务是测量 a：与新同种动物相处的时间和 b：对与熟悉同种动物的偏好。因此，该测试的实验设计允许评估社会行为的两个关键但可区分的方面，例如社会归属/动机，以及社会记忆和新颖性。在这种情况下，“社交性”被定义为与另一只老鼠共度时光的倾向，与单独在相同但空荡荡的房间中花费的时间相比. “对社会新奇事物的偏好”被定义为花时间与以前从未遇到过的鼠标而不是熟悉的鼠标7的倾向。该测试提供了可靠的结果，然后必须通过替代社交测试进行仔细分析、解释和支持/确认。除了特定的应用，克劳利的社交能力测试可以作为突变小鼠一般行为筛选的重要组成部分。
实验准则（白皮书、SOP流程）
设备和房间设置
社交能力和社交新奇偏好测试装置由一个长方形的三室盒子组成。每个腔室为 19 x 45 厘米，分隔墙由透明有机玻璃制成，中间部分开放，可自由进入每个腔室。
使用两个相同的金属丝杯状容器，这些容器带有可移动的盖子，大到足以容纳一只鼠标。这些被垂直放置在设备内，每个侧室中都有一个，将包含天真的/不熟悉的鼠标。每个容器都由金属线组成，以允许圆柱体内部和外部之间的空气交换，但足够小以防止内部动物与外部动物之间的直接物理相互作用。
行为测试应在上午 9:00 至下午 6:00 之间进行。
一般房间照明为 650 勒克斯。
使用 VisuTrak动物行为程序（上海欣软，中国）来监控和记录观察和跟踪参数。
每次试验后，用 70% 乙醇（小鼠之间）清洁所有腔室，然后分别用 Clidox 1:5:1（笼子之间）清洁所有腔室，以防止嗅觉提示偏差并确保适当消毒。
进行观察的人必须距离仪器至少 2 米。
动物准备
根据当地动物保护委员会指南和协议的标准和要求，在一个 12 小时光/暗循环（早上 7:00 开灯）的房间里每笼饲养三到五只老鼠，随意获取食物和水。
在第一次试验开始前 30 分钟将所有装有老鼠的笼子转移到行为室。
该实验需要两类小鼠，一类作为对照、幼稚或“不熟悉”的动物，另一类是测试对象。对于对照小鼠，使用具有相同背景（通常为 C57BL6）、年龄（通常为 8-12 周大）、性别和体重的小鼠，之前未与受试小鼠有任何接触（不是同窝仔）。每个实验需要两只对照小鼠，试验之间可以使用相同的对照小鼠。
习惯（adaptation）
使用分隔的有机玻璃墙隔离左右隔间。
将空的电线容纳杯放在左右室的中间（每个站点一个）。
将测试老鼠放在中间室的中心进行适应。
习惯5分钟。
测试的社会关系方面
将其中一只对照小鼠 ("Stranger 1") 放在位于其中一个侧室的电线收容杯内。Stranger 1 在房间左侧或右侧的放置在试验之间系统地改变。
移除隔间之间的墙壁，以允许测试小鼠自由访问以探索三个腔室中的每一个。
立即开始监控和记录以下参数：
持续时间：对象老鼠与容器杯外壳或不容纳老鼠 Stranger 1 之间的直接（主动）接触次数，分别针对每个腔室。受试老鼠与收容杯之间的直接接触，或受试者老鼠的身体在杯子周围 3-5 厘米的区域内伸展被视为主动接触；
每个隔间中受试小鼠的其他行为数量，包括行走、自我修饰、超过 5 秒没有任何身体运动（“冻结”），以及不寻常的行为，如跳跃、重复行为等；
每个隔间的进入次数。当老鼠的头和四只爪子进入房间时，就认为它在房间里。
测试的持续时间为 10 分钟。
社会新奇/偏好测试部分
将第二只控制鼠标（“陌生人 2”）放在对面室（在第一节期间是空的）的相同电线容器内。监控 描述的相同参数，区分在陌生人 1 与陌生人 2 存在的情况下主体老鼠之间的行为。
会议 II 的持续时间为 10 分钟。
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