考前必刷！冲刺必看！生物观察类实验汇总观察叶绿体和细胞质流动观察质壁分离及复原现
观察类实验
用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动-一个实验
[原理]叶肉细胞中的叶绿体呈绿色、扁平的椭球或球形，不需要染色，制片后直接观察
[目的]使用高倍显微镜观察叶绿体的形态、分布，活细胞中的细胞质处于不断流动状态，观察细胞质的流动可用细胞质基质中叶绿体的运动作为标志
[材料]藓类叶，新鲜的黑藻(首选二者）
或菠菜叶、番薯叶等-便宜，但必须稍带下表皮叶肉，但不能用上表皮
[步骤]观察叶绿体:
(1)制作藓类叶片临时装片:在洁净的载玻片中央滴一滴清水，用镊子取一片藓类的小叶或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮。放入水滴中，盖上盖玻片。
(2)将制作好的叶片临时装片放在低倍显微镜下观察，找到叶肉细胞后，换用高倍显微镜，仔细观察叶肉细胞内叶绿体的形态和分布观察细胞质流动供观察用的黑藻，事先应放在光照、室温条件下培养，从新鲜黑藻枝上取一片柔嫩的小叶放在载玻片水滴中，盖上盖玻片，先用低倍镜观察，后用高倍镜观察，注意观察叶绿体随细胞质流动的情况
注：临时装片时刻有水，失水叶绿体移动范围受限制，严重脱水细胞死亡
实验前先把黑藻放在光照室温下培养，利于细胞质流动
强光：叶绿体椭球体侧面，避免被灼伤
弱光：叶绿体椭球体正面，更好的吸收光能
细胞质不断流动意义：为细胞内物质运输创造条件，保障生命活动正常进行
探究植物细胞的吸水和失水
[原理]成熟的植物细胞的原生质层相当于一层半透膜，细胞液具有一定的浓度，能够渗透失水和吸水
[材料]紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（有大液泡，有颜色）-内表皮无颜色
可用黑藻等叶绿体较多的材料代替，根据叶绿体分布情况判断是否发生质壁分离
[步骤]
(1)制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片
(2)用低倍显微镜观察洋葱鳞片叶外表皮细胞中紫色中央液泡的大小，以及原生质层的位置
(3)从盖玻片的一侧滴入蔗糖（0.3g/ml,可使其分离而不死亡)溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，目的是使盖玻片下面的洋葱鳞片叶外表皮细胞浸润在蔗糖溶液中。
(4)用低倍显微镜观察，看细胞的中央液泡是否逐渐变小，原生质层在什么位置，细胞大小是否变化
(5)在盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引，这样重复几次，洋葱鳞片叶表皮又浸润在清水中
(6)用低倍显微镜观察，看中央液泡是否逐渐变大，原生质层位置有没有变化，细胞的大小有没有变化
[结论]成熟的植物细胞能与外界溶液发生渗透作用，外界溶液浓度大于细胞液浓度时，细胞失水发生质壁分离现象，外界溶液浓度小于细胞液浓度时，细胞吸水发生质壁分离复原现象
注：原生质层,两膜夹一质
滴加方式为引流（吸水纸）
0.5g/ml蔗糖质壁分离明显，但无法复原
一些物质如硝酸钾aq，甘油等可自动复原
必须用镊子取下表皮而不能用刀削（太厚）
教材上一直用的是低倍镜，
实验本身为前后对照
观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂
[原理]在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体的存在状态，就可以判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。染色体容易被碱性染料，如甲紫溶液或醋酸洋红溶液着色。
[目的]制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片;观察植物细胞有丝分裂的过程，识别不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短,绘制植物细胞有丝分裂简图
[材料用具]洋葱(可用葱、蒜代替)、质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量浓度为0.01g/mL或0.02g/ml的甲紫溶液或醋酸洋红液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片
[步骤]
一，洋葱根尖的培养
在上实验课之前的3-4d取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm时，取生长健壮的根尖制成临时装片观察
二装片的制作（四步）
1.解离(1)方法上午10时至下午2时（分生区分裂旺盛），剪取洋葱根尖2-3mm（很难只取分生区），立即放入盛有15%质量分数盐酸和95%体积分数酒精混合液(1:1)（即解离液）的玻璃皿中，在室温下解离。
(2)时间:3-5min
(3)目的:用药液使组织中的细胞相互分离开来（根尖本来是圆柱体，好几层细胞叠落在一起，难以观察）
2.漂洗:(1)方法:待根尖软化后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗
(2)时间:约10min
(3)目的:洗去药液，防止解离过度（主要目的）（解离过度会破坏细胞结构，无法观察染色体）；便于染色（酸与碱反应会影响效果）
3.染色:(1)把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/m或0.02/ml的甲紫溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中染色
(2)时间:3-5min
(3)目的:甲紫溶液或醋酸洋红液能使染色体着色
4.制片:(1)方法:用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水（利于根尖的放置，便于排出气泡），并用镊子尖把根尖弄碎，盖上盖玻片，然后用拇指轻轻地按压盖玻片(使细胞分散开）
(2)目的:使细胞分散开来，有利于观察
三，观察
低倍镜下找到分生区细胞，换上高倍镜，先找中期（最好找），之后找前后末
注：分生区细胞特点：正方形，排列紧密，无大液泡。（题述可为无液泡或有大量小液泡）
解离后细胞已死，无法观察到全过程
间期细胞最多（时间长）
不能用洋葱表皮细胞做（成熟植物细胞）
各部分全是紫色（染液浓度大或者染色时间过长）
低温诱导植物细胞染色体数目的变化
[原理]用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，导致细胞不能分裂成两个子细胞，于是植物细胞染色体数目发生变化。
[目的]学习低温诱导植物染色体数目变化的方法;理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制。
[材料用具]蒜或洋葱(均为二倍体，体细胞中的染色体数为16)、显微镜、卡诺氏液、质量浓度为0.01g/mL的甲紫溶液、质量分数为15 %的盐酸溶液，体积分数为95%的酒精溶液等
[步骤](1)蒜或洋葱在冰箱冷藏室内(4℃)放置一周，取出蒜后将其放在装满清水的容器上方，让蒜的底部接触水面，于室温约(25℃)进行培养，待蒜长出约1cm的不定根时，将整个装置放入冰箱的冷藏室内诱导培养48 -72h（如用洋葱，36h即可，这一步是真正的诱导染色体加倍）
(2)剪取透导处理的根尖约0.5-1cm,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h,以固定细胞的形态（卡诺氏液可以迅速穿过细胞，固定细胞形态并维持染色体结构的完整，也可使染色效果更好，便于观察），然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次
(3)制作装片，包括:解离，漂洗，染色和制片4个步骤，具体操作方法与观察植物细胞的有丝分裂实验相同(4)先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂象。确认某个细胞发生染色体数目变化后，再用高倍镜观察
注：观察有丝分裂也可用卡诺氏液（大学只要观察染色体随便用），但有丝较为明显，所以没有用。本实验涉及到概率较低的变异，用了卡诺氏液效果会好点。
观察蝗虫精母细胞减数分裂装片
[目的]通过观察蝗虫精母细胞减数分裂装片，识别减数分裂不同时期染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解
[材料用具]蝗虫精母细胞减数分裂装片，显微镜
[步骤]
(1)在低倍显微镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂装片。识别初级精母细胞、次级精细胞和精细胞
(2)先在低倍镜下依次找到减数分裂1和减数分裂2不同时期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目
(3)根据观察结果，尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图
注：该实验较为简单（教材的意思是已经做好了装片）
用蝗虫是因为其染色体较大，数目小
蝗虫为二倍体。雄性2n=23，性染色体为XO，雌性2n=24，性染色体为XX
用雄性生殖器官原因：1，雄性产生精细胞数量多于雌性产生的卵细胞
2，大多数动物的卵母细胞只有在遇到精子后才会完成减数分裂2
可用植物观察，如韭菜4n=32，染色体也比较大，材料易得，花药数量大，可用韭菜花粉母细胞观察减数分裂，也能取得较好效果
