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FITC/Cy2/Cy3/Cy5/Cy7/TRITC-Streptavidin荧光标记Streptavidin介绍

2020-10-23 15:34 作者:星戈瑞-荧光居  | 我要投稿

FITC-Streptavidin

花菁染料-Streptavidin

Cy2-Streptavidin

Cy3-Streptavidin

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链霉亲和素(SA)简述:

链霉亲和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合生物素的能力与鸡蛋清中的亲和素相似,等电点6.0,非特异性结合远比亲和素低。

 

链霉亲和素(SA)的来源:

SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物,主要通过2一亚氨基生物索亲和层析法提纯,1L培养液中含蛋白10~60mg。链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈。

 

链霉亲和素(SA)的应用:

1. enzyme immunoassays, 酶免疫测定

2. immunohistochemistry, 免疫组织化学

3. flow cytometry, 流式细胞仪

4. Western blot, 原位杂交

5. immunoblotting procedures免疫印迹程序

6. Western blot免疫印迹

 

链霉亲和素(SA)的荧光标记物及激发波长:

荧光标记的链霉亲和素(SA)的介绍:

FITC-Streptavidin:

FITC是广泛使用的荧光基团,但其最大的缺点是淬灭快,使用抗淬灭剂可以减轻。

 

花菁染料(Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin):

Cy2比FITC更稳定,且在表面荧光显微镜下,Cy2的荧光FITC更强。Cy3和Cy5比大多数荧光基团更亮,更稳定,背景更弱。二者常在共聚焦显微实验中作多标记。但Cy5的缺点是不能用表面荧光显微镜观察,因此通常用具有远红外检测器的共聚焦显微镜观察。

 

TRITC-Streptavidin:

TRITC,RRX,TR:TRITC经常和FITC一起用于双标记实验中,也可以使用RRX或TR,但TR会产生较高的背景。在使用装有氪氢灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记实验时,RRX尤其有用,可以和Cy2(或FITC)及Cy5一起使用,因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间,且和这两者的重叠很少。

 

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