放线菌的培养与形态观察

        放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。放线菌的菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成；大多放线菌的菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长，叫基内菌丝 ( 简称“基丝” ) ，基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝 ( 简称“气丝” ) ，并进一步分化产生孢子丝及孢子。有的放线菌只产生基丝而无气丝。 

       由于基内菌丝长入培养基，接种工具不易挑起，所以为了观察放线菌的形态特征，入们设计了插片法培养放线菌。

       在高氏1号培养基的平板上扦上灭菌盖玻片后接种，放线菌能沿着培养基与盖玻片交界处蔓延生长，而附着在盖玻片上。

        所以观察时，轻轻取出盖玻片（有菌体的一面朝下），置于干净的载玻片上，镜头放在插入盖玻片交界处直接镜检。这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。

实验方法:

插片法培养放线菌

1.制备:高氏固体培养基和灭菌。

2.倒平板：取融化并冷却至大约 50 ℃左右培养基倒平板 ，平板比正常实验平板厚些，凝固待用。

3.扦片：以无菌操作用镊子（无菌手指）将灭菌的盖玻片以大约 40-50度角扦入琼脂内 ，扦片数量可根据需要而定。

 4.接种：用接种环挑取菌种在培养基与盖玻片交界处琼脂平板上划线接种。

5. 培养：将扦片平板倒置， 30-37℃培养，培养时间根据观察的目的而定，通常 3~7d 。 

6. 观察：

（1）拔出盖玻片；

（2）菌体朝下放入载玻片；

 （3）镜头置于盖玻片培养基交接处进行显微观察；

 （4）画出显微观察结果。

实验步骤:.

插片法培养放线菌

1.制备高氏1号固体培养基和灭菌。

2.倒平板：取融化并冷却至大约 50 ℃左右倒平板 ，平板比正常实验平板厚些，凝固待用。

3.扦片

用酒精擦拭工作台→取出盖玻片

4.接种

5.观察

注意事项:

1、倒平板要厚一点。

2、注意无菌操作。