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单克隆抗体和动物体细胞核移植技术来喽~ 【选必三】|0基础救星!

2023-03-19 10:06 作者:此云无幻亦有幻  | 我要投稿

2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体

一、动物细胞融合技术与单克隆抗体

1.动物细胞融合技术

(1)细胞融合定义:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程也称细胞杂交。

(2)原理:细胞膜的流动性。

(3)诱导方法:PEG融合法(聚乙二醇)电融合法和灭活病毒诱导法

(4)意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。

(5)应用:单克隆抗体

植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较

2.单克隆抗体

(1)含义:

抗体是由B淋巴细胞转化而来的浆细胞分泌的,每个B淋巴细胞株只能产生一种专有的、针对一种特异性抗原决定族的抗体。这种从一株单一细胞系产生的抗体就叫做单克隆抗体(McAb),简称单抗

(2)原理:一种B淋巴细胞在抗原的刺激下,只能产生一种针对这种抗原的特异性抗体。

骨髓瘤细胞能够无限增殖,B淋巴细胞与其融合后形成的杂交瘤细胞既能迅速大量增殖,又能产生单一抗体。

(3)培养

用96孔板培养和筛选,将细胞培养液通过稀释,实现尽量每个孔只接种一个杂交瘤细胞,克隆化培养后,提取上清液,加入特定抗原,观察抗原抗体特异性反应,若呈阳性,则为需要的杂交瘤细胞。


1)技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合等。 

2)单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、可大量制备。 

3)单克隆抗体的应用 

①作为诊断试剂; 

②用于治疗疾病和运载药物:如用单克隆抗体运载抗癌药物,制成“生物导弹” 靶向治疗肿瘤。 

二、动物体细胞核移植技术和克隆动物

1.定义

动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2.原理

动物细胞核的全能性。

3.种类

哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植体细胞核移植

4.过程

(2)生物(特别是高等动物)的克隆需要的基本条件:

①具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞(如乳腺上皮细胞)。

②能有效调控细胞核发育的细胞质物质(如去核卵的细胞质)。

③完成胚胎发育的必要的环境条件(如诱导核-质重组细胞生长、分

化的实验条件和怀胎母体的子宫环境)。

5.应用前景及存在的问题

(1)应用:

①加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育。

②保护濒危物种。

③医药卫生方面:

转基因克隆动物作为生物反应器生产医用蛋白;转基因克隆动物细胞、组织作为异种移植的供体,用于人类疾病的治疗;人的核移植胚胎干细胞经诱导分化,形成相应组织、器官,可用于组织器官的移植。

(2)问题

成功率低,产下的活克隆动物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%;绝大多数克隆动物存在健康问题,许多表现出遗传和生理缺陷,如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等;对克隆动物食品的安全性问题存在争议。


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