Day8——抗ADAMTS-7肽疫苗改善动脉粥样硬化和损伤后新生内膜增生
这篇文章是今年发的，利用ADAMTS-7设计了肽疫苗，目的是靶向ADAMTS-7调控的ECM重塑。
Result1：ADAMTS-7肽疫苗有效B细胞表位的设计与筛选
复习一下ADAMTS-7的结构：金属蛋白酶结构域是其降解活性的关键，C末端四个TSP-1样重复序列结合COMP和TSP-1。
疫苗的制作过程：设计三种抗原肽作为B细胞特异性表位，与载体蛋白KLH结合，随后加入明矾佐剂
随后取小鼠注射，在第二次注射之后结扎左颈总动脉，结扎后四周内，三种抗体滴度均上升。
特别地，E1能够显著减少内膜面积
因此，E1抗体具有很大潜力。
Result2：注射ATS7疫苗免疫可抑制小鼠钢丝损伤后新生内膜形成
给小鼠注射两次，然后进行颈总动脉或股动脉的钢丝损伤。抗体滴度随时间升高。
ATS7vac能够抑制损伤颈总动脉的新内膜形成
股动脉类似
Result3：ATS7vac免疫可减轻高脂血症ApoE/-和LDLR-/-小鼠的动脉粥样硬化病变
这一部分验证了疫苗对动脉粥样硬化的预防作用和缓解作用。
动脉粥样硬化造模方式包含两种，一是敲除ApoE，二是敲除LDLR。正文中主要是前者。注射两次疫苗之后，饲喂高脂饮食，监测抗体滴度稳定。测斑块面积，显著小于对照组。
分别染斑块、胶原、巨噬细胞，都少于对照组，而且斑块组成没有区别。
前面是“预防”，接下来是“缓解”
高脂饮食四周之后注射疫苗。
斑块面积明显更小。
Result4：小鼠接种ATS7vac后安全性和T细胞活化的评价
对接种C57BL/6小鼠的生理、组织学、血液生化和血液学指标与未接种小鼠进行了比较。ATS7vac的应用不会引起小鼠明显的器官损伤或造血功能障碍。
并且，具有B细胞表位的E1主要诱导体液免疫反应，而不会引起T细胞介导的对内源性ADAMTS-7的自身免疫反应。
Result5：接种ATS7vac可减轻猪冠状动脉支架内内膜增生
对猪冠状动脉支架植入术后再狭窄进行了临床前评估，ADAMTS-7在冠状动脉支架中显著上调，而在未支架的对照动脉中，ADAMTS-7的表达水平较低。
建立猪的支架内再狭窄模型
植入后28天，疫苗组的心内膜面积、再狭窄率都较低
这一部分证明了疫苗对支架植入后再狭窄的抑制作用
Result6：ATS7vac疫苗产生特异性靶向ADAMTS-7的抗体
这一部分的目的是证明这个疫苗的特异性。在鼠和猪的血清中都验证了仅对ADAMTS-7结合
随后进行了一个奇怪的血液循环配对实验。将免疫过的小鼠与没有免疫的小鼠建立了配对血液循环，共享白细胞，在培养第五周之后发现二者体内抗体滴度接近。
CD45.1小鼠也具有了抑制内膜增生的功能
这一部分证明ATS7vac对新生内膜形成的抑制主要是体内免疫产生针对ADAMTS-7的抗体的结果。 ////不明白的地方：为什么要这么干？是在排除什么情况？？？
Result7：ATS7vac免疫产生的抗体中和血管重构中的ADAMTS-7
这里对疫苗发挥作用的具体机制进行了验证
钢丝损伤后，ADAMTS-7在动脉中呈时间依赖性上调，在由内皮细胞(ECs)和VSMCs组成的新内膜中表达最为显著。
疫苗能降低TSP-1的降解程度
过表达ADAMTS-7能够抑制细胞迁移和增殖，而疫苗可以逆转
还可以加速内皮修复
抑制COMP降解
抑制平滑肌迁移
Discussion
本文的最重大贡献：设计ADAMTS-7疫苗，在小鼠和猪模型中有效抑制损伤后新内膜形成和动脉粥样硬化。
基于B细胞表位，不影响T细胞
使用的载体蛋白是KLH，它具有涉及T细胞表位的高免疫原性，并诱导CD4+ T细胞分化，有利于抗体的产生。明矾佐剂主要激活辅助性T2分化，避免细胞毒性损伤。
读完感觉好厉害
孔老师组关于ADAMTS-7的文章就读完了。从通过生信方法筛选出ADAMTS-7，中间经历对其致病机制的研究和完善，到最后设计出疫苗，历时14年。一路读下来感觉荡气回肠。
免疫部分还是读不明白，会不会下学期学完免疫会好一点。另感觉现在的心血管研究不可避免都要涉及炎症机制，但每次看到都一头雾水，还是得好好学一下qwq
