2020-3-13答疑

问题1：柱子的型号有哪些，分别的填充物是什么，有什么不同，在不同的实验应当怎样选择柱子？
问题2：关于流速的问题，一般样品检测需要多少流速，同样的，不同实验应当怎样选择流速？
问题3：实验时经常会由于一些样品问题和液相溶液问题导致的压力过大，这个的具体原因可以总结一下吗？

1.关于普通C18和色谱柱种类的一些知识，我另外一个视频有讲。

不同的实验应当怎样选择柱子？

这个问题非常复杂，我们实际在做实验的时候不会这么去想这些。我把实际可能出现的问题分成两种情况：

第一，有参考的文献。

我们首先是去找待测物的相关文献，或者标准。

参考别人是用什么做的！然后在这个基础上去优化。如果是峰不好，或者分离效果不好。最好选普通的，常用的。选参数：粒径，柱长。

第二，完全没人用液相做过这东西。

第二种就比较麻烦。

首先，就是确定这物质能不能用现有的检测器测定。如紫外检测器或者二极管检测器，待测物必须紫外吸收。如果是荧光检测器，必须有荧光吸收。假如都没有，那就另说了。

假如说是检测器能做的，我们就先用普通C18去跑，用不同的流动相去试（这个过程非常复杂）。C18的粒径也很多。分离能力也不一样，如果说是分离多个物质，而不是一个待测物，那么情况也会不同。如果说没保留，那就去查待测物的一个性质。看能用其他类型的柱子是否有效。

2.流速，是看情况的。大部分流速都是1.0ml/min左右。流速要根据出峰情况和色谱柱来选择。

3.因为样品问题导致的压力上升只有一个，那就是样品中的杂质在色谱柱中积累，堵住了色谱柱。一般都是前处理的问题。

流动相导致的压力过大，第一个是比例问题。不同的溶剂混合后，溶液的黏度是不一样的，黏度大了之后，压力就会上升了。温度也会影响溶液的黏度。第二个是流速设置过大了。色谱柱如果是粒径比较小的，流速设置不能太大的。第三个是如果流动相有使用到缓冲盐，没有正确使用，导致缓冲盐结晶析出，堵住管路，压力也会变大。