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磺化SPDP-多肽/4-马来酰亚胺基丁酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯/水溶性SPDP

2022-12-20 14:35 作者:ruixibio  | 我要投稿

交联蛋白质的方法(含巯基):

为了形成蛋白A-NH2和蛋白B-SH的交联,蛋白A-NH2用SPDP试剂进行修饰,然后脱盐除去反应副产物和过量的未反应试剂,纯化SPDP修饰的蛋白A-NH2,接着加入含巯基的蛋白B-SH来制备交联物

1.需要材料:水混溶性有机溶剂如二甲基亚砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF),不需要Sulfo-LC-SPDP;含EDTA的磷酸盐缓冲液(PBS-EDTA):100mM磷酸钠,150mM NaCl,1mM EDTA,0.02%叠氮化钠,pH7.5;脱盐柱,足以处理1~2mL样品;待交联的蛋白质:IgG和β-半乳糖苷酶分别代表含有胺基和巯基的蛋白质。

2.程序:打开SPDP试剂瓶前先平衡至室温;立即使用前,准备20mM SPDP试剂溶液将2mg试剂溶于320μlDMSO或DMF中;溶解2~5mg IgG在1.0mL PBS-EDTA中,加入25μL 20mM SPDP溶液;室温下孵育30分钟;用PBS-EDTA平衡的脱盐柱纯化SPDP修饰的IgG,去除反应副产物和过量的未反应的SPDP试剂;向IgG溶液中加入1~3mg β-半乳糖苷酶(β-gal/IgG摩尔比约1~3),并将反应混合物在室温下孵育过夜。蛋白质(本示例中的IgG和β-半乳糖苷酶)已交联。

 

产品名称:水溶性SPDP、磺化SPDP-多肽

状态:固体/粉末/溶液

产品规格:mg

保存:冷藏

储藏条件:-20℃

储存时间:1年

用途:科研

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验

 

产品名称:4-马来酰亚胺基丁酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯

状态:固体/粉末/溶液

产品规格:mg

保存:冷藏

储藏条件:-20℃

储存时间:1年

用途:科研

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验

 

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