高分子化合物偶联阿霉素药物的制备
c-Met它是HGF的高亲和性配体,由c-Met原癌基因编码,其基因定位于染色体7q31.c-Met是由45KD的a链和145KD的跨膜β链组成的190KD的跨膜糖蛋白内,广泛的表达于多种人体正常组织,但在临床中呈现出异常的高表达、突变或活性改变。c-Met能够破坏CA间的粘附,促进运动:激活引起增殖和迁移;参与CA的生成,使CA易于进入血液循环并获得转移的能力;其它膜受体存在交联(cross-talk),现己确知这种交联可促进CA形成及转移。
HGF 又称离散因子,是一种具有多重生物学活性的因子,HGF的活性形式是由一对二硫键连接的69KDa链和34KD的β链组成,当c-Met与HGF结合后,HGF/c-Met信号通路即被活化:首先c-Met靠近胞内区的四个磷酸化位点的酪氨酸残基发生自身磷酸化,激活下游的Gab-l、Grb22、Shc和c-Cb1 等衔接蛋白(adaptor);通过不同的机制引发一系列的磷酸化反应活化P1-3K、ERKI/2、PLC-Y、STATS和FAK等重要的信号分别活化相应的信号通路,从而调节CA的迁移、增殖和侵袭能力。

阿霉素-Met抗体偶联物的制备:取活化过的阿霉素溶液然后加入抗体溶液,于25℃下搅拌反应1小时,然后再4℃下搅拌过夜。取反应液放置于分子截留量为3000的透析袋中,在磷酸缓冲液中透析24小时,每4小时换液一次。用分子截留量为3000的超滤离心管超滤浓缩,取浓缩液经SephadexG-100凝胶柱柱层析纯化,收集目标组分,冻干得阿霉素-Met抗体偶联物DOX-Met antibody conjugates。
阿霉素-Met抗体偶联物有效的减少了游离阿霉素,阿霉素-Met抗体偶联物治疗组的动物体重无明显的波动,具有缓释的效果,可延长药物在体内的滞留时间,增加其在CA组织的蓄积,从而提高药物的效果,同时也延长了动物的生存时间。
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