放射免疫分析 (RIA)

放射免疫分析 (RIA)

放射免疫测定 (RIA) 是一种使用放射性标记分子逐步形成免疫复合物的免疫测定。 RIA 是一种非常灵敏的体外测定技术，用于测量物质浓度，通常测量抗原浓度。

放射免疫测定或 RIA 是基于竞争性结合的原理。 在该技术中，未标记的抗原与放射性标记抗原（具有 125I-γ 发射的放射性标记，结合蛋白质的酪氨酸或 3H-β 粒子发射）与高亲和力抗体之间发生竞争性结合。 首先，抗原混合物用该浓度的已知量的抗体标记，它能够使抗体上的抗原结合位点饱和，通过它我们可以通过 beta 或 gamma 计数器计算每分钟的总计数 (CPU)，之后的数量 获得了使已知量的抗体饱和所需的放射性标记抗原。

图1：放射免疫分析 (RIA)。

将已知量的抗体（与之前使用的相同）添加到试管中，然后将已知量的放射性标记抗原与未知浓度的未标记测试样品一起加入越来越多的抗原，并允许 标记抗原和未标记抗原之间对抗体上可用抗原结合位点的竞争，由于抗体不能区分标记抗原和未标记抗原，随着未标记抗原浓度的逐渐增加，这会导致标记抗原的置换，从而降低 在测试样品存在期间抗体结合放射性标记抗原的量（这称为每分钟计数减少-CPM）。 它用于测量测试样品中存在的抗原量。

在放射性降低和未标记抗原的已知浓度之间生成的标准曲线。 随着它们在实验过程中浓度的增加，这被称为标准，我们通过在该图上添加含有抗原的未标记样品并绘制该值，在我们的实验中减少放射性值或每分钟计数 (CPU) 值 在标准图上，我们得到未标记样本中的抗原浓度。 我们可以采用以前存在的标准图，但通常，标准与实验同时运行，并且它们生成的图用于确定未知样本中的反值。

RIA 用于检测激素、药物血清蛋白和维生素的水平，可以检测到 1 毫升或更少的 0.001 微克。