艾美捷TrueBlack Plus脂褐素自体荧光猝灭剂解决方案
TrueBlack® Plus 是由 Biotium 化学家开发的下一代脂褐素猝灭剂。TrueBlack® Plus 是水溶性的，因此可以在 PBS 而不是乙醇中进行淬火。它极大地减少了脂褐素的自发荧光，并且具有最小的远红背景。
艾美捷TrueBlack® Plus脂褐素自体荧光猝灭剂，40 X，DMSO溶液#BTM-23014具有更低远红背景的淬灭脂褐素：
唯1可用于水性缓冲液而不是 70% EtOH 的脂褐素猝灭剂；
在缓冲液中淬火可以延长厚样品的孵育时间而不会收缩，与疏水性污渍兼容；
无有害溶剂；
减少来自其他来源（如红细胞和细胞外基质）的自发荧光；
在免疫荧光染色之前或之后处理组织。
未经淬火处理的甲醇固定人大脑皮层冷冻切片中的脂褐素自发荧光显示为在所有通道中发出荧光的明亮点状斑点，合并后的图像呈粉红色。苏丹黑 B 的传统处理会引入高水平的远红背景荧光。用原装 TrueBlack® 处理可消除脂褐素自发荧光，但仍会引入低水平的红色/远红色荧光。TrueBlack® Plus 可在 PBS 中代替 70% 乙醇使用，并以最低水平的远红背景淬灭脂褐素自发荧光。
TrueBlack® Plus：独特的脂褐素猝灭剂
自体荧光是组织切片和一些原代细胞类型中非特异性背景荧光的主要来源。自发荧光的来源包括醛类固定剂、具有内源性荧光的组织成分（包括细胞外基质蛋白、红细胞和巨噬细胞）和脂褐素，它由氧化蛋白质和脂质的高度自发荧光颗粒组成，随着年龄的增长在细胞的溶酶体中积累. 虽然通常在蓝色和绿色波长中最亮，但自发荧光具有广谱荧光，除非淬灭或掩蔽，否则几乎不可能检测到组织中的特定荧光信号。
据报道，许多处理方法可以减少自发荧光，包括用硫酸铵和 Tris 淬灭醛类、用硼氢化钠漂白以及用蓝色或黑色染料淬灭自发荧光。亲脂性染料苏丹黑 B 能高效地掩盖脂褐素的自发荧光，但存在引入红色荧光背景的缺点。Biotium原创的 TrueBlack® 脂褐素自发荧光淬灭剂（货号 23007) 是作为苏丹黑 B 的替代品开发的。它可以有效地淬灭脂褐素自发荧光，背景比苏丹黑 B 低得多，但仍然引入低水平的远红背景。此外，与苏丹黑 B 一样，使用原始 TrueBlack® 淬灭剂处理必须在 70% 乙醇中进行，这与某些染色方案和样本类型不相容。
开发 TrueBlack® Plus 可使脂褐素在水性缓冲液中淬灭，背景甚至比原始 TrueBlack® 更低。在 PBS 中淬火可以延长厚样品的孵育时间而不会收缩，并且与疏水性污渍兼容。
注意：为获得合适的效果，Biotium建议使用EverBrite™ 封片剂等基于甘油的封片剂封片样品。
