Waters Q-tof液质联用仪的标准操作规程3.3质谱调谐窗口各项参数设定

菜鸟博士（悬空七少）

3.3质谱调谐窗口各项参数设定

3.3.1在MassLynx软件左侧快捷键位置，点击 MS Tune打开质谱调谐界面。

3.3.2点击质谱调谐右下角Opearate按钮，使仪器处于开机工作状态。

3.3.3在质谱调谐界面选择离子模式。

3.3.4设置参数

(1)           Capillary Voltage:毛细管电压主要起到离子化的作用，一般来说，毛细管电压越高，信号越强。正离子一般设在0.5~3.2kV，常用为3.0kV；负离子在0.5~2.6kV，常用为2.5kV。毛细管电压设置过高，会导致毛细管放电，损坏毛细管。

(2)           Sample Cone: 将带电离子吸入锥孔，理论上锥孔电压越高进入的离子越多，可设范围为25~100V。一般设为35-40V,小分子药物设为25V。sample cone电压过高时，会在源内产生离子碎片。对于SYNAPT G2-Si，锥孔电压对源内裂解的影响很小，可忽略。

(3)           Sample offset：常设在40~80V之间。

(4)           Source (°C)：常设范围为：60~120°C。加热源温可以阻止溶剂在真空区域聚集。源温设定需根据样品的流速而定。

(5)           Desolvation (°C)：Typically 150-650 °C。脱溶剂气温度是来协助溶剂蒸发。脱溶剂气温度设定需根据溶剂的流速及组成而定。

(6)           Cone Gas (L/hr)：Typically 0 ~ 50 L/hr。氮气反吹气环绕与锥孔电压，减少溶剂簇群的形成。

(7)           Desolvation gas (L/hr): Typically 300-1000 L/h。用于溶剂的蒸发。脱溶剂气流速设定需根据溶剂的流速及组成而定。

(8)           离子模式的选择：碱性化合物宜用正离子方式；酸性化合物宜用负离子方式；如未知,可能正负都要做。

(9)           分析模式：灵敏度模式 分辨率模式 高分辨模式 超高分辨模式。

3.3.5在MS tune窗口进入Instrument界面。

Note:此处碰撞能一定处于off状态，否则会使母离子在TOF1通道中打碎。

3.3.6在MS tune窗口进入fluidics界面。

1.Fluidics flow control 有三个控制图标，分别为 Start infusion开始进样、 Refill the syringe重新灌满注射器、 Purge syringe清洗并灌注注射器。

2.在Flow state选项下可选择相应的流路。Sample流路下有4中流路状态，在液质联用下，sample flow state需选在LC状态下。在Lockspray flow state流路下只有infusion和waste。

Infusion是选择的校正液进质谱，LC出来的溶液进废液。

Combined是校正液和LC一起进质谱。

LC是校正液进废液，LC出来的溶液进质谱。

Waste是校正液和LC一起进废液。

3.选择相应的Reservoir, Lockspray fluidics会自动purge，purge完之后在infusion flow rate下设定流速，点击infusion，即实现从intellistart进样。

3.3.7 点击File > Save As... 保存质谱调谐名字。

3.3.8在SYNAPT G2-SI质谱前面板左侧IntelliStart fluidics system位置放置溶液。样品储液瓶安装在仪器前面板上。在仪器软件中选择一种溶剂后，LED将照亮相应的储液瓶。可以同时照亮所有三个样品储液瓶，或熄灭光敏样品的 LED。

A: 乙腈：H2O=50：50
B: 0.2 ng/μL亮氨酸脑啡肽Leucine enkephalin

C: 0.5 mM甲酸钠Sodium Formate

3.3.9整数位质量数Veff值校正

Veff值check（Veff值确保整数位质量数的准确度）。若LE的所测质量数比理论值之差大于±0.1Da，则需要更改Veff值。进入System view，System à Acquisition setting.....à Calculate and set Veff，在Reference Mass里输入LE的准确分子量（正离子下(Pos Mode)556.28，负离子下（Neg Mode）554.26），在Measured Mass输入tune page上LE所测得的分子量，点击Calculate，然后update，即可。