单细胞测序 cellranger
下载安装
10X官网可以有很详细的下载和安装顺序。需要注意几点
需要下载参考序列和cellranger软件。建议分别下载在不同的文件夹,software、reference
版本问题 10X更新较快,同一批数据建议使用相同的版本运行。
添加环境变量,以便在全局使用
运行
一般拿到数据都是fastq了。思路是:
建立rawdata文件夹,
上传数据,检查md5,
创建新的project,
在project中创建数据的软连接,
对fastq文件改名,以符合cellragner的运行格式,
写一个bash文件,方便不同数据的运行,
输出log文件,方便后期查看运行情况,
transcriptome=/home/wangjs/reference/10X/rna/refdata-gex-GRCh38-2020-A
fastqs=/home/wangjs/data/cellranger_out/zhangyi/pd1/data
#cellranger count --id hdq_pbmc_befpd1 --transcriptome $transcriptome --fastqs $fastqs --sample ZY201014 --chemistry SC3Pv3 --localmem 100 --localcores 30
fastqs为软链接文件夹,transcriptome为参考序列,--id为样本名,这个在样本信息表格中保存好,方便后期查对,所有输出文件都在这个文件中。--chemistry SC3Pv3 可以不用,cellrargner会截取数据自行判断。内存和线程根据自己服务器的情况来进行定义。

