干货:组织学常用的染色剂和染料
法国解剖学家Bichat在1801年引入“tissue”的概念,之后在19世纪 “tissue science”成为一门学科。德国解剖学家卡尔·迈耶(Karl Meyer) 于1819年第一次提出“histology”这一名词。组织学家依靠现成的化学物质,借助于染色剂和染料,研究人员将特定的组织结构,细胞、组织甚至微生物中的化学元素形象化。本文主要概述一些组织学常用的染色剂和染料。

1., 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 蓝色
a.1971年,由奥托丹恩(Otto Dann)的实验室首次合成,用于锥虫病治疗药物。
b.选择性地与双链DNA结合,没有(或极少)细胞质染色,可作为绿色或红色荧光标签的复染剂。
c.可用于哺乳动物、细菌和后生动物细胞的DNA染色。
2.Acid Fast(AF) 红粉色
a.也称为Ziehl–Neelsen染色,首次在19世纪发现,使用很广泛。
b.一种重要的鉴别染色剂,识别耐酸的细菌生物,如分枝杆菌和诺卡氏菌属。
c.对于诊断结核病尤为重要。
3.Alkaline phosphatase 红/紫色
a.通用的干细胞膜标记物。
b.通常用于在重组流程的早期阶段筛选菌落(染色维持干细胞的生存能力)。
c.也可以作为一个阴性选择工具在生长后期识别未分化的细胞。
4.Bielschowsky Stain 背景黄到棕色
a.由Max Bielschowsk引入的一种银染方法,对Ramon y Cajal的方法进行了一些改进。
b.可以用来观察神经纤维,经常用于研究阿尔茨海默氏症。
5.Gram Stain 革兰氏阳性细菌:深蓝色;革兰氏阴性菌:红粉色
由Hans Christian Gram于1884年发现。这种染色剂将细菌归类为革兰氏阳性细胞(例如葡萄球菌),通常有较厚的肽聚糖网,或革兰氏阴性细胞(如大肠杆菌、沙门氏菌),通常在肽聚糖外有一种脂多糖层。
6.Congo Red 淡橙红色
虽然已经发现一段时间了,仍然是诊断学家们在组织中鉴定淀粉样蛋白的“黄金标准”测试(最常发生在阿尔茨海默氏症患者身上)。
7.Grocott-Gomori's Methenamine Silver 黑色
a.一种“广谱”真菌染色,比PAS染色更能检测出甚至是退化和死的真菌。
b.对碳水化合物染色特别有用。
c.用于真菌感染的一般筛检。
8.Hematoxylin and Eosin 苏木精和伊红
a.最常用的“通用染色剂”用于常规的组织准备。
b.在1876年,一名化学家Wissowzky联合使用了苏木精和伊红染色。
c.核:蓝色(苏木精); 内质网:蓝色(苏木精); 弹性纤维:粉红色(伊红); 网状纤维:粉红色(伊红); 网状纤维:粉红色(伊红); 红细胞:橙色/红色
9.Hoechst stain 赫斯特染色 蓝色
a.Hoechst染料特异性地与双链DNA的A/T丰富区域结合,没有(或极少)细胞质染色。
b.与DAPI相比,这些染料毒性更小,细胞渗透性更强。
10.Luxol Fast Blue
a.它是一种铜酞菁染料,它可溶于酒精,被吸引至在髓鞘脂蛋白中发现的碱基。
b.通常用于检测中枢神经系统中的髓鞘。
c.通常伴随一个复染剂。
d.髓鞘纤维:蓝色或蓝/绿色; 神经元:紫色(复染色时); 红细胞:蓝色
11.Methylene Blue 亚甲蓝 蓝色
阳离子染料,与组织中的阴离子结合,如羧酸、硫酸和磷酸基团。
12.Oil Red O
与苏丹染料密切相关,用于在新鲜的冷冻组织切片中显示脂肪或脂质,也用于法医病理学,以增强油性手指产生的潜在指纹。
13.Periodic-acid Schiff
a.用于研究或诊断糖原贮积病或基底膜疾病。
b.苏木精通常用作反染色剂观察其他组织元素。
c.当PAS被用于染色真菌生物时,首选的是浅绿色的反染色剂。
14.Perl’s Prussian Blue
a.重要的染色剂,用于识别含铁血黄素沉积的患者,例如在某些肝脏疾病或溶
血性贫血。
b.铁沉淀物:蓝色或紫色; 其他组织成分:红色(用中性红复染)
15.Toluidine Blue
a.有助于在电子显微镜下染色树脂-嵌入组织薄片,以帮助进行样品的定向和可
视化。
b.肥大细胞颗粒和多糖:紫色;核, 细胞质, 红细胞, 胶原纤维:蓝色
16.Trichrome
a.使用三种(酸性)染料来产生不同的(基本)组织元素的颜色的技术。
b.这种染色通常用于诊断实验室评估肝病,如肝硬化。
c.各种各样的染色方法存在,其中Masson’s Trichrome和Gömöri’s Trichrome是最常用的。
17.Verhoeff-van Gieson Stain
a.Verhoeff组件是一种铁-苏木精染色剂,而van Gieson组件则是一种胶原特
b.异性的复染剂,由苦酸和酸性品红组成。
c.用于证实组织中弹性纤维的存在与否。
d.弹性纤维和细胞核:黑色(Verhoeff成分);胶原蛋白和肌肉:红色(van Gieson成分);细胞质细胞质及其他成分:黄色
18.Warthin-Starry 微生物:深棕色到黑色
a.硝酸银为基础的染色法
b.被认为是检测革兰氏阴性生物的最佳方法,如小型杆菌和螺旋体。