TCO-PEG-RB,反式环辛烯-聚乙二醇,罗丹明衍生物用于超分辨荧光显微成像
TCO-PEG-RB,反式环辛烯-聚乙二醇,罗丹明衍生物用于超分辨荧光显微成像
今天小编整理并分享关于罗丹明衍生物用于超分辨荧光显微成像：
目前，超分辨荧光显微成像技术主要分为三大类:受激发射耗损技术l16(stimulated emission depletion，STED)、结构光照明显微镜技术(structured illumination microscopy，SIM)、光激活定位显微镜技术(photo-activation localization microscopy, PALM)与随机光学重构显微镜技术(stochasticoptical reconstruction microscopy, STORM)。
罗丹明衍生物的合成：罗丹明B链接PEG的衍生物（ RhB-4PEG,RhB-7PEG，.RhB-
.10PEG,RhB-22PEG)
将罗丹明B (7.200 g, 15.00 mmol)，四乙基二乙醇单甲醚（3.124 g, 15.00 mmol)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐EDC·HCI (3.600 g,18.00 mmol）和干燥的CH2Cl2 ( 120 mL)添加到一个装有磁力搅拌棒的圆底烧瓶中。在冰水浴中冷却0℃后，搅拌15 min，再将4-二甲基吡啶DMAP (2.190.g, 18.00 mmol)加入到圆底烧瓶中。该反应在25℃温度下过夜，将反应停止。先用旋转蒸发仪将CH2Cl2除去，再加入.200 mL乙醇，发现圆底烧瓶瓶底有白色沉淀，利用抽滤将白色沉淀除去，然后利用旋转蒸发仪将滤液中的乙醇除去。最后用层析色谱柱将粗产物进行纯化(洗脱液:CH2Cl2然后，CH2Cl2/CH3CH2OH = 10/1, v/v)，.将过柱液用旋转蒸发仪除去溶剂后，加入约50 mL CH2Cl2，再加入约50 mL的水（加入约4 mL浓盐酸）进行萃取洗涤3次。在用无水 Na2SO4将萃取液进行干燥后，用旋转蒸发仪将CH2Cl2除去，得到红色黏状样品（2.510 g,25%)。
罗丹明B分子的光漂白速度很快，刚开始时处于“亮态”的罗丹明B分子个数骤减。大约2s后处于“亮态”的分子个数已经很少，之后趋于稳定阶段。通过RhB，RhB-4PEG，RhB-22PEG三种物质在相同的实验条件下，得到的光子数和占空比的信息，可以发现随着聚乙二醇(PEG)单元数的增加，罗丹明B与聚乙二醇链接产生的衍生物的光子数和占空比都有先增大后减小的趋势。在接下来的工作需要找到具有合适单元数的聚乙二醇与罗丹明B的衍生物，使得其光子数尽可能大，而占空比尽可能小，以达到优化超分辨荧光图像的目的。
TCO-PEG-FITC，反式环辛烯-聚乙二醇-荧光素
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