HQO；线粒体自噬荧光探针

HQO诱导自噬、细胞染色和共聚焦成像：适当条件诱导自噬（如无血清培养基、PBS或者细胞自噬激活剂处理等），HQO（10 μM）加入无血清培养基中，37℃孵育10 min，PBS洗涤1-3次，共聚焦成像。559 nm激发，570-610 nm发射波长为示踪正常线粒体的荧光；635 nm激发，650-730 nm发射波长为示踪自噬溶酶体的荧光。

图1.HQO化学结构

HQO荧光原理：HQO需与其它探针分子组合使用，进入活细胞后选择性富集于线粒体；当线粒体发生自噬形成自噬溶酶体后其微环境pH下降，使HQO质子化；质子化后HQO的荧光激发和发射波长均发生红移（斯托克斯位移大于100 nm）。由于微环境pH值的不同，使得HQO在线粒体和自噬溶酶体中呈现不同颜色荧光（图2），因而可以很好地区分正常线粒体和包被损伤线粒体的自噬溶酶体。

图2.HQO荧光原理

HQO基础信息

中文名：线粒体自噬荧光探针HQO；线粒体自噬探针；2,6-双（2-（3,3-二甲基-1-丙基 - 二氢吲哚-2-亚基）亚乙基） - 环己酮；

英文名：HQO；Mitochondrial Autophagy Fluorescent Probe；2,6-bis(2-(3,3-dimethyl-1-propylindolin-2-ylidene)ethylidene)cyclohexan-1-one 

CAS号：1442645-34-2

结构式：CCCN1C2=CC=CC=C2C(C1=CC=C3CCCC(=CC=C4C(C5=CC=CC=C5N4CCC)(C)C)C3=O)(C)C

分子式：C36H44N2O

分子量：520.75

性状：红色至深红色至红棕色结晶粉末

储藏条件：-20°C储存，-80°C储存时间更长（1-2年）

使用案例

图3.HQO监测饥饿条件下细胞发生线粒体自噬过程