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细胞膜可渗透钙离子荧光探针

2023-07-25 14:06 作者:biofount科研试剂  | 我要投稿

OG 488 BAPTA-1 AM

OG 488 BAPTA-1 AM(244167-57-5)是一种可渗透细胞的荧光标记Ca2+指示剂,由细胞可渗透Ca2+螯合剂(BAPTA AM)偶联的绿色荧光探针(OG 488)组成。Ca2+结合后,荧光强度比静息强度增加约14倍。显示均匀的细胞分布,亚细胞区隔最少。激发/发射λ494/523 nm。

图1.OG 488 BAPTA-1 AM分子结构


图2.OG 488 BAPTA-1 AM荧光光谱

Cal-520 AM


Cal-520 AM 为检测细胞内钙动员提供了一种强大的基于均质荧光的检测工具。Cal-520 AM是一种新型荧光钙敏感染料,与现有的绿色钙指示剂(如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM)相比,具有显着改善的信噪比和细胞内保留。表达通过钙发出信号的GPCR或感兴趣的钙通道的细胞可以预加载可以穿过细胞膜的Cal-520 AM。一旦进入细胞,Cal-520 AM的亲脂性封闭基团就会被酯酶切割,从而产生带负电荷的荧光染料留在细胞内。与钙结合后,其荧光大大增强。当细胞用激动剂刺激时,受体发出细胞内钙释放信号,这显着增加Cal-520的荧光。Cal-520 AM波长长、灵敏度高、荧光增强>100倍的特点,是测量细胞钙的理想指标。高信噪比和更好的细胞内保留使 Cal-520 钙测定成为评估 GPCR 和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的强大工具。

图3.没有丙磺舒的CHO-M1细胞中内源性P2Y受体对ATP的反应。将CHO-M1细胞在96孔黑壁/透明底板中以每100μL/孔40,000个细胞接种过夜。将100μl4μMFluo-3AM,Fluo-4AM或Cal 520 AM在HHBS中加入孔中,并将细胞在37℃下孵育2小时。用100μlHHBS替换染料加载培养基,加入50μl300μMATP,然后使用FITC通道用荧光显微镜(Olympus IX71)成像。

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