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Sanger 双脱氧链终止法测序的基本原理。

2022-02-02 10:04 作者:生物yes  | 我要投稿

        双脱氧链终止法测序的基本原理是:以待测DNA片段为模板,利用酶法合成与待测片段互补的DNA链。在正常的合成体系中分别加入4种3位缺少羟基的双脱氧核苷酸底物,即ddATP、ddGTP、 ddCTP、 ddTTP, 制备出四套末端标记的DNA片段。由于ddNTPs一旦掺入合成的DNA链|其链的合成即被终止,这样得到一套长短不一的片段,而每套片段被打断的位置却位于同一碱基,4套片段分别打断在A、T、C、G处。当对这4个不同碱基产生的4套DNA片段进行变性胶电泳分离时,即可产生一个可以直接读出DNA顺序的梯状区带

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