miR-342-5p基因/miR181a/miR-214基因/HGF/cir cRNA/miR205/circScmh1基因修饰

今天瑞禧小编要分享的内容是miR-342-5p基因/miR181a基因/miR-214基因/HGF基因/cir cRNA/miR205/circScmh1基因X修饰外泌体的研究制备，一起来看！

外泌体（exosome）是细胞分泌的纳米级（30-100 nm）囊泡，能够通过其携带的miRNAs，多肽和蛋白质等生物活性物质向临近或远距组织器官传递信息，影响细胞功能。因此，外泌体介导了一种新的细胞间通讯方式。最新研究发现，健康受试者单次急性运动后即刻，循环外泌体的数量增加，并且循环外泌体中超过300种蛋白质的量也明显增加，提示循环外泌体可能在运动的系统性适应中发挥重要作用。但是，目前长期有氧运动对循环外泌体的影响及其在运动促进心脏健康中的作用尚不清楚。

实验目的:

1.明确长期有氧运动条件下循环外泌体的变化。

2揭示循环外泌体在运动心脏保护中的作用及其主要机制。

实验方法:

1.招募空军军医大学赛艇队运动员和不运动对照学员研究长期有氧运动对人循环

外泌体数量及成分的影响。

2构建SD大鼠4周游泳运动模型研究长期有氧运动对大鼠循环外泌体数量、成分

及功能的影响。

3 在末次运动结束后24 h时采用超速离心法分离血浆外泌体，用透射电镜和蛋白

免疫印迹技术鉴定外泌体，采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术分析提取的外泌体粒径分布情况。

4.构建SD大鼠MI/R(30 min/24 h)模型和原代培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R，

12 h/3 h）模型，评估长期有氧运动诱导的循环外泌体的心肌保护作用。

5.采用miRNA高通量测序技术分析运动组和安静对照组大鼠循环外泌体中

miRNAs的表达差异。采用实时定量PCR(qRT-PCR）技术检测外泌体和组织中特定miRNA的水平。

6采用双荧光素酶报告基因系统和蛋白免疫印迹技术确定特定miRNA靶基因。7．采用修饰的腺相关病毒（AAV9)和 miRNA agomir在体下调或者上调心脏特定

miRNA水平。

8.采用GraphPad Prism软件进行统计学分析。

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RXYWX.2022.4.26