实验报告：蛙坐骨神经干动作电位的引导

实验一：蛙坐骨神经干动作电位的引导

蛙坐骨神经干兴奋传导速度测定和不应期的观察

实验目的：

1．学习离体神经双相和单相动作电位的记录方法。

2．分析和判断动作电位的波形，观察其波幅、时程及潜伏期。

3．学习神经干动作电位传导速度的测定和不应期的观察。

实验原理：

复合神经干双相动作电位记录原理：

神经干动作电位是神经兴奋的标志，当神经干受到适当强度的电刺激时，刺激电极下的神经纤维膜去极化达到阈电位，产生动作电位，并沿神经纤维膜传导。若将一对引导电极置于完整的神经干表面，当神经干的一端受刺激而兴奋时，动作电位将先后通过这两个引导电极处，便可引导出两个方向相反的电位偏转波形，称为双相动作电位。

复合神经干单相动作电位记录原理：

若将两个引导电极之间的神经纤维损伤，阻断其间兴奋传导，那么共奋波只能通过第一个引导电极处，不能传至第二个引导电极处，故只能记录单方向的电位偏转波形，称为半相动作电位。

强度法则原理：

神陉干是由许多不同直径和类型的神经纤维组成，因此神经干动作电位是许多神经纤维电活动的总和，是一种复合动作电位。与单根神经纤维的动作电位不同，神经干动作电位的幅度遵循“全或无”原则，其幅度在一定范围内可随刺激强度的增加而增大，即为强度法则。

传导速度测定原理：

通过测定标本屏蔽盒中一段神经的长度(即传导的距离s)以及兴奋通过这段距离所用的时间t，根据公式，即可计算出动作电位在神经干上的传导速度v。在本实验中，通过同步采集两对引导电极所记录的复合动作电位，测量出动作电位通过这段长度神经干所需时间，从而计算传导速度。

不应期的观察原理：

可兴奋组织在一次兴奋后，其兴奋性发生周期性变化，依此经过了绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后恢复至静息状态。组织兴奋性的高低或有无，可通过测其阈值大小来确定。先在神经干上施加一个条件刺激使其兴奋，再用一个检验性刺激落在兴奋过程的不同时间，检测神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及产生的动作电位的幅度，以判定组织兴奋性的变化。

实验对象：蟾蜍

实验步骤：1. 蛙坐骨神经标本的制备

(1) 破坏蛙中枢神经系统

(2) 剪除躯干上部及内脏

(3) 去皮

(4) 游离坐骨神经干

2. 连接实验装置

观察项目及结果分析(只作定性描述)：

1、双相动作电位的观察

波形特点描述：出现两个方向相反的波峰，且第一个波峰的绝对值更大

阙刺激强度：0.110V，此时可观察到：出现动作电位，出现两个波峰

最大刺激强度：1.410V，此时可观察到：刺激强度增大但波峰的绝对值不变

当刺激大于阈刺激但小于最大刺激时，随着刺激强度的增加可观察到：波峰的绝对值随刺激增大而增大

2、传导速度的测定

两对记录电极之间的距离=1.5cm  传导速度= 25m/s

3、不应期的测定：条件刺激=检测刺激=最大刺激

当时间间隔>6.5ms时，检测刺激落在第一次兴奋后的不应期之外，此时可观察到：两次动作电位的值相同，产生的波峰绝对值相同

当间隔时间=5.5ms时，检测刺激进入第一次兴奋后的相对不应期，此时可观察到：第二次刺激后又出现一个动作电位，产生的波峰绝对值比第一次小

当间隔时间=1.5ms时，检测刺激进入第一次兴奋后的绝对不应期，此时可观察到：只有刺激但不出现双相电位，只有第一次兴奋的动作电位

4、单相动作电位的观察

用镊子将一对记录电极之间的神经夹伤，此时可观察到：有仅有一个正方向的波峰，即单相动作电位。

注意事项：

①　分离神经干时勿损伤神经组织，神经干标本尽量长一些；

②　实验过程中注意用任氏液保持神经干的湿润，但要避免标本上过量的任氏液造成电极间短路；

③　神经干标本平直地放置于电极上，并与各电极保持良好接触；

④　刺激强度应由弱至强逐步递增，以免过强刺激损伤神经干；

⑤　两对记录电极之间的距离不宜过短，尽可能长一些；

⑥　刺激应达到使神经干产生最大动作电位的最大刺激强度。

实验数据均由up实验时所得

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与华中科技大学同济医学院

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