如何放大PD-1阻断剂抗肿瘤效果？
PD-1阻断剂是一种免疫检查点抑制剂，可以通过解除肿瘤细胞对免疫细胞的抑制，激活T细胞的抗肿瘤免疫反应。PD-1阻断剂已经在多种肿瘤中显示出显著的临床效果，但是仍有部分患者对其不敏感或耐药。
如何放大PD-1阻断剂的抗肿瘤效果是当前肿瘤免疫治疗的重要课题，有多种可能的策略，如联合其他免疫检查点抑制剂、靶向药物、细胞因子等。本文将重点介绍一种利用干扰素（IFN）-α增强PD-1阻断剂治疗效果的机制，该机制由复旦大学附属中山医院樊嘉院士、复旦大学基础医学院药理学系朱棣、复旦大学附属中山医院徐泱团队合作在Cancer Discovery上发表。
该机制涉及以下几个方面：
IFN-α通过调控肿瘤细胞中FosB的转录活动，抑制缺氧诱导因子HIF1α，从而抑制肿瘤细胞糖酵解，降低对葡萄糖的摄取，重塑并形成富含葡萄糖的肿瘤微环境（TME）。
高葡萄糖的TME促进T细胞mTOR-FOXM1信号通路活化，使肿瘤浸润CD8+T细胞高表达共刺激分子CD27，增强其杀伤功能。
PD-1阻断剂能够解除TILC2（肿瘤固有淋巴细胞）中PD-1信号通路的抑制，进一步激活TILC2细胞，释放CCL5，募集CD103+树突状细胞，协同CD27+CD8+T细胞发挥抗肿瘤免疫反应。
IFN-α+PD-1阻断剂联合治疗能够显著抑制肝癌和胰腺癌等难治性肿瘤的生长和转移，在HCC患者中具有较高的响应率，并显著抑制HCC的疾病进展。
本文所采用的实验方法和技术主要包括以下几个方面：
肿瘤模型的建立：本文使用了两种不同的肝癌细胞系Hepa1-6和H22，分别接种到C57BL/6和BALB/c小鼠的肝脏中，建立原位同基因小鼠肝癌模型1。此外，本文还使用了来自肝癌患者的类器官（PDO），与自体的肿瘤浸润免疫细胞共培养，建立体外肝癌模型。
免疫检测的方法：本文使用了多种免疫检测的方法，包括质谱流式（CyTOF）、多色免疫荧光、单细胞测序、ELISA、ELISPOT等，来检测肿瘤组织中的CD45+免疫细胞以及其表达的细胞因子、细胞毒性颗粒、共刺激分子等免疫指标。
数据分析的方法：本文使用了R软件和GraphPad Prism软件进行数据分析，包括基因集富集分析（GSEA）、生存曲线分析、统计学分析等，来评估不同治疗方案对肿瘤生长和转移、免疫细胞功能、信号通路活化等方面的影响。
本文的结果部分主要包括以下几个方面：
IFN-α+PD-1阻断联合治疗显著抑制肿瘤发生发展：本文观察了15例无法进行手术切除的肝癌患者，并给予IFN-α+PD-1阻断联合治疗。结果发现，联合治疗后ORR为40.0%，DCR高达80.0%，同时没有出现因治疗导致的死亡病例。此外，本文还使用了两种不同的肝癌细胞系Hepa1-6和H22，分别接种到C57BL/6和BALB/c小鼠的肝脏中，建立原位同基因小鼠肝癌模型。结果发现，相较于IFN-α或PD-1阻断等单一治疗，IFN-α+PD-1阻断联合治疗能够显著抑制肿瘤的发生发展，同时，肿瘤小鼠生存期明显延长。
IFN-α+PD-1阻断联合治疗促进CD27+CD8+T细胞比例：本文使用了质谱流式（CyTOF）、多色免疫荧光、单细胞测序等方法，检测了肿瘤组织中的CD45+免疫细胞以及其表达的免疫指标。结果发现，IFN-α+PD-1阻断联合治疗能够显著降低耗竭CD8+T细胞前体的数量。同时，经过IFN-α+PD-1阻断联合治疗后，肿瘤组织中CD27+CD8+T细胞亚群的数量显著增加。此外，本文还使用了来自肝癌患者的类器官（PDO），与自体的肿瘤浸润免疫细胞共培养，也观察到了类似的现象，即IFN-α+PD-1阻断联合处理能够在最大程度上增加CD8+T细胞上CD27的表达。
IFN-α+PD-1阻断联合治疗抑制肿瘤细胞糖酵解：本文使用了基因集富集分析（GSEA）、免疫印迹、细胞外酸化率（ECAR）等方法，检测了肿瘤细胞中的HIF1α信号通路和糖酵解相关指标。结果发现，阻断PD-1会促进肿瘤细胞中的HIF1α信号通路，然而，联合治疗则显著抑制HIF1α信号通路。与肿瘤细胞相反的是，肿瘤浸润CD8+T细胞在经过PD-1阻断后，HIF1α及其下游分子的表达有所下降，而IFN-α+PD-1阻断联合处理则会起到相反的结果，导致CD8+T细胞摄取葡萄糖的能力增强，从而促进其增殖和活化
本研究主要探索研究IFN-α+PD-1阻断联合治疗对肝癌的抗肿瘤效果及其机制。主要发现的是：
IFN-α+PD-1阻断联合治疗能够显著抑制肿瘤的发生发展，提高肝癌患者的响应率和生存期。
IFN-α+PD-1阻断联合治疗能够增加肿瘤组织中CD27+CD8+T细胞亚群的数量和功能，从而增强免疫杀伤效应。
IFN-α+PD-1阻断联合治疗能够通过调控FosB-HIF1α信号轴，抑制肿瘤细胞糖酵解，重塑富含葡萄糖的肿瘤微环境，从而促进CD8+T细胞的活化和增殖。
