三羧酸循环是真核细胞能量代谢的中心

（1）  三羧酸循环是糖、脂肪和蛋白质三种主要有机物在体内彻底氧化的共同代谢途径。三羧酸循环的起始物乙酰辅酶A，  不仅是糖类分解的产物，还可来自脂肪的甘油、脂肪酸和某些氨基酸代谢。

（2）  三羧酸循环脱氢过程中产生的氢经呼吸传递体传递的过程中伴随电子传递和质子的跨线粒体内膜转运，最终在膜间隙  中累积质子，建立质子动力势，驱动ATP合成，而ATP是生物体内进行各种生命活动的直接能量来源。

 当质子通过ATP酶上的质子通道由膜间隙流到线粒体基质中时，催化ADP磷酸化形成ATP。电子传递和形成ATP的偶联机  制即氧化磷酸化作用。在氧化磷酸化中，磷酸化所需能量由氧化作用供给，氧化作用形成的能量通过磷酸化作用储存。

①将分离出的线粒体置于含有0.1M   KCl的pH为9的缓冲液中，经过一段时间的渗透作用，线粒体基质与周围的缓冲液达到平衡。

②将线粒体提取出来放入不含有KCl但是含有缬氨霉素的pH为7的缓冲液中。缬氨霉素能够穿过细胞膜，监测ATP产生情 况。