NK细胞培养注意要点有哪些?
自然杀伤(NK)作为免疫细胞治疗技术中具有代表性的细胞之一,于1975 年被学者Kiessling发现并命名,其起源于骨髓中的淋巴前体细胞,并在发育成熟后广泛分布于外周血、骨髓、淋巴结、脾脏、肺和肝脏中。NK细胞是天然免疫系统的重要组成的一部分,它来源于CD34+造血干细胞,因其可以在没有抗原预敏的条件下以主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)非限制性方式快速杀伤靶细胞而成为免疫治疗的研究热点。原代NK细胞是一种比较难培养的细胞,很多同学在培养过程会遇到诸多困扰,那么一起来了解一下NK细胞培养注意要点有哪些吧!
NK细胞培养注意要点如下:
1. 所使用试剂避免反复冻融,使用时注意无菌操作。
2. 在第0天,NK细胞激活剂按照培养基体积(包括血浆量)的1%添加。
3. 第0天的细胞接种密度可以在2.5~3.5×106个/mL的范围内,如果是复苏的单个核细胞,建议提高接 种密度至4×106个/mL。
4. 采血量可以根据每mL外周血1×106个PBMCs估算。
5. 采血时不能用EDTA抗凝剂,可选用肝素或者枸橼酸NA抗凝剂。
6. 复苏的PBMCs、血浆异常的样本可以使用 SuperGrow® 细胞培养添加物替代自体血浆。
7.当培养基平衡至室温时再使用。
以上就是NK细胞培养注意要点有哪些的相关内容,若您还有其他问题请联系百奥创新客服!
