蛋白酶K（Proteinase K）

蛋白酶 K(39450-01-6,Proteinase K)是一种广谱丝氨酸蛋白酶,蛋白酶 K于1974年在fungus Engyodontium album的提取物中发现。蛋白酶 K能够消化角蛋白，因此被称为“蛋白酶 K”。蛋白酶 K可水解多种肽键，经常用于清除酶促反应或细胞裂解液。蛋白酶 K可用在制备DNA和RNA的过程中去除内源性核酸酶，并用于制备原位杂交的组织切片。蛋白酶 K通常在pH7.5-9.0和温度37-70°C的范围内使用。

溶解度Solubilitysolubility（H2O）: soluble 10mg/mL, clear, colorless

性状solid power,40unit/mg dry weight

储藏条件 Storage conditions储存温度-4℃

酶活性：
评估酶的活性和功能的标准是酶活，而不是其纯度。1 AU（AU=Anson单位）定义为在37°C、pH 7.5下每分钟从酪蛋白中释放1.0 µmol（181 µg）酪氨酸的酶量。

酶促反应分三步进行：
※ 酶和底物混合在一起
※ 底物与酶的活性位点结合，形成酶-底物复合物
※ 反应发生，形成与酶分离的产物。

蛋白酶K应用：
※ 在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
※ 用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
※ 其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
※ 用于测定酶在细胞膜上的定位
※ 用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
※ 用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。

蛋白酶K作用：
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。