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Alexa Fluor 647标记链霉亲和素,关于AF647可用于荧光显微成像?

2023-09-20 17:50 作者:瑞禧生物08  | 我要投稿

Alexa Fluor 647标记链霉亲和素,关于AF647可用于荧光显微成像?

今天小编整理并分享关于AF647可用于荧光显微成像:

荧光显微技术:

荧光分子吸收一些颜色的光并几乎立即发射相较吸收光能量低,波长更长的另一些颜色的光。这一过程称为激发和发射,发射的光称为荧光。而发射荧光的波长相对于激发波长的改变的现象被称为斯托克斯位移(Stokes shift)。斯托克斯位移正是荧光显微成像的关键:根据波长的差异选择性地滤除激发光而不过滤发射光,如此仅发射荧光的物体能被成像。时至今日,荧光标记的特异性使荧光显微成为强大的生物学研究手段。

荧光显微使用的荧光标记物探针主要有有机合成染料(dyes),荧光蛋白

(fluorescent proteins, FP),半导体量子点(quantum dots, QDs)等。可用的炎光探针跨越了可见光光谱的所有部分。同时,发展了用荧光探针标记生物分子的许多特异性方法。

定位显微中使用的有机合成染料的状态转变的主要的形式有:

荧光状态转变: 这是最常见的状态转变形式。有机合成染料通常在非激发状态下处于基态,当受到适当波长的激发光后,它们会转移到激发态。在激发态下,染料分子可以发出荧光。这种状态转变是荧光显微镜成像的基础,可以用来可视化和研究细胞和分子结构。

荧光基团的结构改变以红色花青类(cyanine)染料(如Cy5,Alexafluor 637)为典型,与其他化学物质的反应(通常是含疏基的物质,比如疏基乙醇(BME))造成荧光基团结构改变,这一过程需要耗氧环境和激发光诱导。

吸收状态转变: 在吸收状态转变中,染料分子吸收特定波长的光并转移到激发态,但不会发出荧光。这种状态转变可以用于一些光学技术,如光热成像,其中染料吸收光能并将其转化为热能。

光化学状态转变: 有些有机合成染料具有光敏性,可以在受到特定波长的激发光后发生化学反应,导致其分子结构发生变化。这种状态转变在光控制的分子工具中具有重要应用,如光控制的离子通道。

光解状态转变: 光解状态转变中,染料分子受到光激发后发生分解或分子结构改变。这种状态转变在光刻和光解的应用中有用。

能量转移状态转变: 能量转移状态转变涉及到染料分子之间的能量传递。在荧光共振能量转移(FRET)中,两种不同的染料分子之间发生能量传递,其中一个染料分子的荧光会被另一个染料分子吸收,从而产生信号变化。

这些状态转变形式是在定位显微镜成像和其他光学技术中常见的,它们允许研究者可视化和控制分子和细胞的特定属性和行为。


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以上来源于文献整理,如有侵权,请联系删除,RL2023.9。



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