转染与转化的区别
什么是转染
转染是通过病毒方法以外的方式将 DNA 或 RNA 人工引入哺乳动物细胞的过程。 大多数时候,感兴趣的 DNA 片段被连接到一个载体中,该载体可以是质粒、粘粒、BAC(细菌人工染色体)、YAC(酵母人工染色体)或 HAC(人类人工染色体)。 最常见的转染方法是化学介导的转染,如磷酸钙共沉淀、脂质体和物理方法,如电穿孔、基因枪技术和显微注射。
图 1:人类卵子的显微注射
根据转移的 DNA 在细胞内存在的时间长短,可以识别两种类型的转染。 它们是瞬时转染和稳定转染。 在瞬时转染中,引入的 DNA 在细胞内存在的时间有限,而在稳定转染中,引入的 DNA 在细胞内持续存在很长一段时间,因为它已整合到基因组中。
什么是转化
转化是植物、酵母、细菌细胞的感受态细胞摄取外来DNA的自然过程。 它通过在细胞膜上形成孔隙来诱导细胞具有能力,裸露的 DNA 通过这些孔隙进入细胞。
图 2:细菌转化
通过转化进行基因转移的三种方法是化学转化、电穿孔和粒子轰击。 转化的一般方法是化学转化,其中用氯化钙处理宿主细胞使细胞更容易吸收外源 DNA。 这个细胞阶段称为感受态细胞。 然后,通过热休克在细胞膜上暂时产生孔隙。 在电穿孔中,通过电击使细胞具有活性。 粒子轰击是将 DNA 转移到植物细胞中的一般方法,其中 DNA 包被的金或钨通过基因枪物理强制进入细胞。
转染与转化的区别
定义:转染是将裸核酸或纯化核酸故意引入真核细胞的过程,而转化是指通过细胞膜从周围环境中直接摄取和掺入外源遗传物质。
细胞类型:转染将外源 DNA 引入哺乳动物细胞,而转化将外源 DNA 引入植物、酵母或细菌细胞。
引入方法:转染使用磷酸钙共沉淀、脂质体、电穿孔、基因枪技术和显微注射进行基因转移,而转化使用化学转化、电穿孔和粒子轰击。
结论
转染是将外源 DNA 引入哺乳动物细胞,而转化是将外源 DNA 引入细菌、酵母或植物细胞。这两种方法都不依赖于基因转移的病毒方法。转染和转化之间的主要区别是基因转移到的细胞类型。