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艾美捷测序级 II,纯化胰蛋白酶用途和相关研究方案

2022-11-16 15:29 作者:艾美捷  | 我要投稿

测序级 II,纯化胰蛋白酶背景:

胰蛋白酶是一种胰丝氨酸蛋白酶,基于带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链,具有底物特异性。它来源于34kDa的无活性前体酶原胰蛋白酶原,在酶促去除N-末端6-氨基酸前导序列后产生23.8kDa胰蛋白酶分子。最适pH为8.0。胰蛋白酶被有机磷化合物如二异丙基氟磷酸盐和来自胰腺的天然抑制剂抑制。大豆、利马豆和蛋清也是天然抑制剂的来源。胰蛋白酶裂解精氨酸和赖氨酸的酰胺和酯键。沃辛顿测序级胰蛋白酶已被进一步纯化,以去除可能干扰胰蛋白酶消化实验的微量污染蛋白酶和自溶产物,并在PAGE上显示出单一条带。

 

艾美捷测序级 II,纯化胰蛋白酶用途:

在组织培养工作中,许多研究人员使用了沃辛顿胰蛋白酶,TRSEQZ、TRSEQII和TRTPCK通常用于蛋白质测序、定位和结构研究。沃辛顿改良测序级胰蛋白酶,SequeENZ™,TRSEQZ经过广泛纯化以去除可能影响消化过程特异性的污染蛋白酶和胰蛋白酶自溶副产物。随后,对酶进行化学修饰以最小化自溶过程并增加稳定性。进一步处理改性的胰蛋白酶以去除残留的自降解产物。化学修饰后,常规检查酶的特异性。

 

稳定性/储存:大多数等级的沃辛顿胰蛋白酶在2-8°C下储存时可稳定2-3年。防止受潮。

注:1mg胰蛋白酶≥180个TAME单位,10350个BAEE单位,3450个USP/NF单位。

TAME单元:一个单元在25°C,pH 8.2,10mM钙存在下,每分钟水解1µmol对甲苯磺酰基-L-精-氨-酸甲酯(TAME)。

 

技术说明:病毒和支原体游离胰蛋白酶(TRTVMF)已通过0.22微米孔径的膜过滤,冻干,接受γ射线照射,并测试病毒和支菌体。

 

艾美捷测序级 II,纯化胰蛋白酶相关研究:

糜蛋白酶(CDAG/CDS/CDI)

胶原酶(CLS1-4/CLSPA)

脱氧核糖核酸酶I(DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

透明质酸酶(HSE/HSEP)

中性蛋白酶(Dispase,NPRO)

蛋白酶K(PROK)

胰蛋白酶抑制剂(LBI/OI/SI/SIC)

细胞分离优化系统(CIT)

肝细胞分离系统(HIS)

新生儿心肌细胞隔离系统(NCIS)

木瓜蛋白酶解离系统(PDS/PDS2)


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