从工具就开始埋下高考考点的【基因工程-1】来喽~【选必三】|0基础救星！

3.1 重组 DNA 技术的基本工具

一、基因工程

1.定义

又叫“基因的拼接技术”或“重组DNA技术”。是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。

2.实质

基因工程的实质是基因重组。基因重组是指整段DNA在细胞内或细胞间、甚至在不同物种之间进行交换，并能在新的位置上复制、转录和翻译，是生物界的普遍现象。

【基因重组】

减一：前期--交叉互换

减一：后期--自由组合

3.基因工程的理论基础

4.分析

二、重组 DNA 技术的基本工具

1.限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）来源：从微生物（主要是原核生物）体内分离出来

（2）功能：从能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性

（3）作用位点：“切割”的是磷酸二酯键，且只切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（4）结果：形成黏性末端或平末端

（5）限制酶的命名

用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母，组成了3个字母的略语，以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。

e.g 从大肠杆菌的R型菌株分离来的，就用字母EcoR表示；如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶，则进一步表示成EcoR I;

流感嗜血杆菌d株中先后分离到3种限制酶，则分别命名为:Hind I,Hind II,Hind III

（6）识别的序列的特点

呈现碱基互补对称，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，称为回文序列。

在切割部位，一条链从5’往3’读的碱基顺序与另一条链5’往3’读的顺序完全一致

★不同酶可以切出相同黏性末端（同尾酶：识别DNA分子中不同核苷酸序列，但能切割产生相同黏性末端的限制酶）

2.DNA连接酶

（1）作用：将双链DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（2）常见种类：E·coli DNA连接酶（只连黏性未端）T₄DNA连接酶（两种末端都能连）。

（4）常见酶的比较

3.基因进入受体细胞的载体（运载体）

（1）载体的作用：

①将外源基因转移到受体细胞中去：

②利用载体在受体细胞内对外源基因进行大量复制。

(2）具备条件：

①能在受体细胞中稳定保存并复制；

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段（基因）插入其中；

③具有标记基因（如抗性基因、产物具有颜色反应的基因等），便于重组DNA分子的筛选；

④大小合适，便于操作。

③对受体细胞无伤害。

（3）种类：质粒、噬菌体、动植物病毒等。

（4）质粒

质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体（或拟核）以外的DNA分子，存在于细胞质中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性状，有利于细菌在特定的环境条件下生存。

组成要素：特殊的标记基因、复制原点、启动子、终止子、目的基因插入位点

★在基因工程中真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行人工改造的

笔记下载：

蓝奏云：笔记下载：

蓝奏云：https://wwyf.lanzoul.com/b04ds92tg 密码:cywh