EZElisa雌二醇ELISA试剂盒参数分析&样品制备方案

雌二醇（E2）是一种类固醇激素，属于雌激素，也是主要的女性性激素。它以及在调节发情和月经女性生殖周期方面起着重要作用。雌二醇在青春期、成年期和妊娠期间对于女性生殖组织（如乳房、子宫和阴道）的发育和维持至关重要，但它也对许多其他组织产生重要影响，包括骨骼、脂肪、皮肤、肝脏和大脑。虽然男性的雌激素水平较女性低，但雌激素在男性中也有重要功能。它存在于大多数脊椎动物、甲壳动物、昆虫、鱼类和其他动物物种中。该试剂盒采用竞争性抑制酶免疫测定技术。所提供的微孔板已经预包被了特异性抗雌二醇抗体。标准品或样品与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的雌二醇一起加入到微孔板的孔中。竞争性抑制反应在HRP标记的雌二醇与未标记的雌二醇与抗体之间展开。将底物溶液加入到孔中，颜色的发展与样品中雌二醇的含量相反。停止颜色的发展并测量颜色的强度。   艾美捷EZElisa雌二醇ELISA试剂盒基本参数： 目录号：D-AEK0003 规格：48T/96T 储存：在4°C下储存12个月，避光。 检测范围：40 pg/mL-1,000 pg/mL 灵敏度：40 pg/mL 精密度：内部试验精密度：变异系数（CV）＜15%。间接试验精密度：变异系数（CV）＜15% 恢复率：恢复率范围为85%至115%，总体平均恢复率为100% 特异性：EZElisa™雌二醇（E2）ELISA试剂盒对雌二醇的检测具有高灵敏度和优异的特异性。未观察到雌二醇与类似物之间的显著交叉反应或干扰。 适用样品：血清、血浆   供应材料和储存条件：

Note: Std1: 0 pg/mL; Std2: 40 pg/mL; Std3: 100 pg/mL; Std4: 200 pg/mL; Std5: 400 pg/mL; Std6；1,000 pg/mL.

EZElisa雌二醇ELISA试剂盒试剂准备： 注意：使用前将所有试剂平衡至室温。按照微孔板读数仪的说明进行设置，并在测量光密度之前预热15分钟。

1×洗涤缓冲液：将洗涤缓冲液（20×）用去离子水稀释1:20，得到1×洗涤缓冲液。储存在4°C。如果洗涤缓冲液浓缩物中形成了结晶，请轻轻加热至完全溶解。储存在室温下。请注意，1×洗涤缓冲液稳定期为30天。

工作溶液：根据辣根过氧化物酶偶联的雌二醇的体积取相应的检测缓冲液1/10，并与辣根过氧化物酶偶联的雌二醇混合，得到工作溶液，使用前进行混合。例如：取3 mL辣根过氧化物酶偶联的雌二醇，加入0.3 mL检测缓冲液，混合得到工作溶液。

EZElisa雌二醇ELISA试剂盒样品制备：

1.血清：使用血清分离管，在室温下凝固样品30分钟后，以1,000 g的速度离心15分钟。立即使用血清进行检测，或将样品分装并储存在-20°C。避免反复冻融循环。

2.血浆：使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在采集后30分钟内以1,000 g的速度离心15分钟。立即进行检测，或将样品分装并储存在-20°C。避免反复冻融循环。

注意：不要使用明显溶血或脂肪乳化的样本。如果样品将在24小时内使用，可以储存在2到8°C。避免反复冻融循环。在进行检测前，应将冷冻样品缓慢恢复至室温，并轻轻混匀。

  程序分析：

1. 从微孔板架上取下多余的微孔板条，将它们放回包含干燥剂包的铝箔袋中，并重新密封。 2. 每个孔中加入50 μL标准品或样品。建议将所有标准品和样品都复制加入微孔板中。设置一个空白孔，不加入任何溶液。 3. 向每个孔中加入50 μL工作溶液（空白孔除外），充分混匀，用提供的孔盖盖好，然后在37°C下孵育1小时。 4. 倒掉每个孔中的液体并进行洗涤，总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动微孔板洗涤器，将每个孔填满1×洗涤缓冲液（250 μL），静置10秒钟，每个步骤中完全去除液体对良好的性能至关重要。在最后一次洗涤后，倒转孔板并用干净的纸巾轻轻拍干任何剩余的1×洗涤缓冲液。 5. 向每个孔中加入50 μL HRP底物A和50 μL HRP底物B，充分混匀，并用提供的孔盖盖好。在37°C下孵育15分钟。将孔板放在黑暗中，远离气流和其他温度波动。 6. 向每个孔中加入50 μL停止溶液。停止溶液应按照HRP底物的加入顺序加入到孔板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色是绿色，或者颜色变化不均匀，请轻轻敲击孔板以确保充分混合。 7. 在30分钟内使用设置为450 nm的微孔板读数仪测定每个孔的光密度。   该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。