干货分享 | 一文了解多重扩增子测序

扩增子测序是一种高靶向性方法，用于分析特定基因组区域中的基因变异。扩增子测序主要包括16S rDNA测序、18S rDNA测序、ITS测序及目标区域扩增子测序等。

ABclonal早期推出一款适用于多样品的16S 扩增子测序，详见推文。ABclonal作为酶原料公司，正在积极关注多重扩增酶的应用。

多重扩增与普通扩增的差异

多重扩增子测序即针对感兴趣的目标区域，设计多重PCR引物进行扩增富集并进行测序的技术。通常适用于检测几十到几千个位点，或几十kb以下的区域。

建库流程

多重扩增子测序的优势

多重扩增子应用领域

扩增子捕获测序作为全基因组测序的补充技术是非常有用的，它大大简化了实验流程和分析目标。该技术已被证明是一个快速、有效的技术，并在新一代高通量测序中发挥独特之处，已经产生了许多令人兴奋的新发现，应用领域也越来越广泛。

多重PCR的延伸关联技术

ABclonal相关产品

多重 PCR (Multiplex polymerase chain reaction，MPCR)因在同一体系里加入多对引物合成多对扩增子，易发生引物间及扩增子间的串扰，故需要对体系进行优化，否则会造成检测结果的不准确。

ABclonal有着丰富的聚合酶库，及体系优化的经验，推出了相关系列产品。

1、Truepol 2X PCR Mix for Microbiome（RK20720)一款针对微生物多样性检测开发的产品，对于各种类型的样本均有很高的扩增效率。同时，试剂盒中增加的某些特定因子，增强了产品的抗抑制剂能力，提高了检测的灵敏度，即使存在大量宿主DNA的干扰，仍能够表现出良好的扩增效率，较大地提高微生物检测的成功率。可用于一般及复杂样本，如人类组织样本，土壤样本，粪便样本，空气滤膜样本，沙土样本等。

2、2X Multiplex PCR Master Mix（BK0051)

一款基于新一代热启动高保真聚合酶Gloria Nova 聚合酶而开发的扩增试剂，具有高保真性和优异的扩增性能，同时耐受尿嘧啶，具有3´-5´外切酶活性。

针对多重PCR扩增进行了定向优化，适用于10~100ng起始量的各种gDNA、FFPE、cfDNA模板。优化后的扩增试剂中含有反应所需的dNTPs、镁离子和反应缓冲buffer，可以覆盖宽泛的GC区间与引物Tm值。

3、Multiplex PCR Kit(BK0079)

含有多重PCR专用热启动DNA聚合酶（Multiplex PCR Enzymes），具有优异的扩增性能，同时耐受尿嘧啶；延伸速率1 kb/min；

本试剂盒提供深度优化的专用缓冲液2.5X Multiplex PCR Buffer，能够在默认条件下稳定、高效地完成绝大多数多重PCR检测，适用范围广，最大程度地减少了反应体系优化步骤。还提供Multiplex PCR GC Enhancer，针对某些Panel，添加GC Enhancer可以提高扩增特异性。