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标记试剂的平衡基团、反应基团和报告基团之间的键在质谱分析的哪个阶段断裂

2023-05-05 13:32 作者:百泰派克生物科技  | 我要投稿

TMT(Tandem Mass Tag)串联质量标签是一种体外肽标记蛋白定量技术。TMT试剂标签由氨基反应基团、质量平衡基团和质量报告基团三部分组成,氨基反应基团能特异性识别多肽N末端和赖氨酸侧链基团并发生共价结合,形成多肽-氨基反应基团-质量平衡基团-质量报告基团复合物,实现多肽同位素标记。

质量报告基团和质量平衡基团各有10种不同的分子量,但其组成的试剂标签的总质量相同。因此,一级质谱中被TMT标记的不同来源的同一肽段表现出相同的质荷比;在二级质谱中,TMT质量报告基团被断裂,释放出TMT报告离子;在三级质谱中,TMT质量平衡基团被断裂释放。释放出的质量不同的报告离子通过二级质谱和三级质谱检测得到来自不同肽段的报告离子峰强度与离子峰质荷比,通过软件结合相应数据库对离子峰强度和质荷比值进行分析,可以计算样品蛋白的含量。

百泰派克生物科技使用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合nanoLC-MS/MS纳升色谱,提供TMT定量蛋白组分析一站式服务,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的蛋白寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白酶切、肽段标价、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。


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