YY/T0506.5-2009阻干态微生物穿透测试仪步骤及技术要求？

一、符合标准：ISO 22612、YY/T 5056.5-2009

二、测试原理

本试验是在分别固定在一个容器上的试件上进行的。在这些容器中,5个携带枯草杆菌滑石粉的容器,1个加入未染菌滑石粉的容器作为对照。在各容器底部离试件下方近距离插人1个培养皿。支撑容器的设备靠1个气体球式振荡器使其振荡,穿透试件的滑石粉全部落到培养皿上,取出培养皿并培养。对生长的菌落进行计数。

二、试验条件

KDS-WY03阻干态微生物穿透样品在20℃士2 ℃和65%+5%的相对湿度下进行状态调节和试验。

三、 设备结构（见图1)

3.1 10 mm厚的石板,如大理石,40 cmx40 cm,下面各角部装有4个橡胶支撑。

3.2 气动球式振荡器1,每分钟能产生 20 800 次振动,作用力为 650 N。

4.3 振荡器通过螺钉连接到大理石板的上表面一个侧边处。

5.4 适宜的压缩空气流量计,能测量每分钟产生 20 800(347 Hz)次振动频率的气流。

6.5 6个不锈钢试验容器。

7.6 一个带有6个孔、适合于安装试验容器的不锈钢板,用夹具将其固定于石板上。

四、 试验容器注:见图 2

4.1 一个适宜的带盖的不锈钢容器。金属活塞可通过盖上的中心孔插人到达盖下面10mm处,插人后确保试件不松弛。

4.2 每个容器底部附近的狭口内插有一个培养皿。

4.3为确保容器与石板之间有良好的接触，每个容器底部的凸缘处配有一个橡胶圈，通过一个固定板来加以固定。

4.4 容器的边缘有一定的斜度以防止插人时损坏试件。

4.5 配有一个直径 9 cm含 TGE 琼脂培养皿。

五、 测试步骤

5.1 将50g滑石粉暨于适宜的容器内,在 160 ℃干热2+.h。

5.3 分 50 次(50x100 μL)将芽孢溶液加到滑石粉上。

5.4 每加一次用涡旋振荡器(Vortex vibrator)振荡封闭后的容器。

5.5 将该容器敞口放人含有硅凝胶的干燥器中,室温下干燥2d~3d

5.6 干燥前后对容器称重,确保完全干燥。

5.7在TGE琼脂上35℃下培养该葬孢滑石粉混合物,评价其生物色载(共进行三次试验,每次重复两次),以滑石粉含孢子数 CFU/g 表示。

5.8 最终浓度宜为 108 CFU/g滑石粉,应确保芽孢在滑石粉中分布均匀。

5.9 裁切12个200 mmx200 mm 试件。

5.10将试件各装人灭菌袋中按制造商所给方法灭菌。

5.11将各容器装入灭菌袋中并灭菌。

5.12 用固定板和夹具将容器的底部可靠固定在石板上。

5.12 用无菌操作法将试件从袋子中取出,放在各试验容器的口上。

5.16 通过向下推活塞,使盖子固定于容器上,以使试件在受控的松弛程度下固定。

5. 17取下活塞。

5.18通过活塞口向试件上加人0.5g+0.1g染菌的滑石粉,第六个作为对照的容器加人未染菌滑石粉。

5.19用贴膜封住活塞口。

5.20每个容器上盖上一个小塑料袋。

5.21将无盖培养皿通过各容器底部的狭口插人。

5.22用粘贴胶带封闭狭口。

5.23以每分钟 20 800 次的振动频率振动 30 min

5.24去除塑料袋和粘贴胶带。

5.25通过狭口插人培养皿的盖子。

5.26取出培养皿并在 35 ℃培养 24 h。

5.27对形成的菌落计数。对照皿宜为0读数。否则说明有外来污染,宜中止试验。

5.28 对每个材料重复5.9~5.27。

5.29计算 10 个有效结果的算术平均值。

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