T7 RNA聚合酶的两种类型和适用范围

T7 RNA 聚合酶是一种依赖 DNA 的 RNA 聚合酶，其对噬菌体 T7 启动子序列有高特异性。该酶从 T7 启动子插入到转录载体下游的 DNA 上合成大量 RNA。可获取 T7 RNA 聚合酶技术公告。

 

应用：标记和未标记的 RNA 转录本的合成。

 

来源：从在质粒上表达 T7 RNA 聚合酶基因的大肠杆菌纯化获得。

 

性能和质量检验：3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口检测；

转录反应中的性能。

 

T7 RNA聚合酶类型：

常规型和耐热型。常规型T7 RNA聚合酶可在37℃对模板进行高效体外转录，而耐热型T7 RNA聚合酶可在更高的温度下进行体外转录。基于此耐热的体外转录反应特性具有以下优势：

1.提升了GC含量较高RNA的转录效率；

2.提升了长片段RNA的合成能力；

3.在使用帽类似物时，提高了共转录的加帽效率；

4.减少了dsRNA 副产物的形成，降低了合成RNA的免疫原性。

 

艾美捷T7 RNA聚合酶:

英文名字：T7 RNA Polymerase

货号：C-BSM0124

规格：5000 U / 25000 U

组成：T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer

纯度：SDS-PAGE检测结果大于95%。

核内残留物：将20 U T7 RNA聚合酶与超螺旋质粒DNA在37°C下孵育4小时，DNA电泳未检测到质粒的变化

残留DNA酶：将T7 RNA聚合酶与双链DNA在37°C下孵育16小时，DNA电泳未检测到DNA变化。

RNase残基：将T7 RNA聚合酶与RNA在37°C下孵育1小时，电泳中未检测到RNA降解

 

T7 RNA聚合酶适用范围：

1. 合成单链 RNA，包括 mRNA，siRNA，gRNA 等各类 RNA 的前体。

2. 合成标记或未标记的高特异性 RNA 探针。

3. 利用帽子类似物合成加帽的 mRNA。

 

推荐的反应条件：

在37°C下培养1小时。如果转录物长度小于300nt，反应时间可以延长至2-16小时。反应结束后，在上述20μl反应混合物中加入1μl双脱氧核糖核酸酶，并在37°C下孵育15分钟以移动DNA模板