使用DAPI染细胞的AbMole操作教程

摘要：本教程将介绍如何使用DAPI染料对细胞进行染色，涵盖了所需试剂的配制方法、具体实验步骤以及注意事项。

DAPI是一种荧光染料，主要用于标记细胞核，便于观察细胞核的形态和数量。DAPI可作为DNA特异性探针用于流式细胞仪、染色体染色、组织化学和生物化学中的DNA可视化和定量。

一、试剂和配制方法

1. DAPI染料：可以从AbMole生物购买目录号为M5107的溶液型式，1 mg/mL的浓度。

2. DAPI染料工作液：使用PBS（磷酸盐缓冲液）或者其他适合的稀释液，将DAPI储备液稀释至1 μg/mL的工作浓度。用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。

3. 固定液：4%多聚甲醛溶液。

4. 渗透液：0.1% Triton X-100（AbMole，目录号 M9162）溶液。

5. 封片用的抗褪色剂：可以选择市售的抗褪色剂，如VECTASHIELD Mounting Medium等。

二、实验步骤

1. 将细胞种植在适当的载玻片或培养皿中，使其达到适当的生长状态。

2. 用PBS洗涤细胞2-3次，每次5分钟。

3. 向细胞上加入预先准备好的4%多聚甲醛溶液，静置15-20分钟以固定细胞。

4. 用PBS洗涤细胞2-3次，每次5分钟。

5. 向细胞上加入0.1% Triton X-100溶液，静置5-10分钟以渗透细胞。

6. 用PBS洗涤细胞2-3次，每次5分钟。

7. 向细胞上加入1 μg/mL DAPI染料稀释液，静置5-10分钟以染色细胞核。

8. 用PBS洗涤细胞2-3次，每次5分钟。

9. 用抗褪色剂封片，然后使用荧光显微镜观察细胞核的形态和数量。

三、注意事项

1. DAPI染料具有光敏性，请在避光条件下操作。

2. DAPI染料使用时，请佩戴实验室防护用品，如实验服、手套和护目镜。

3. 操作过程中注意避免细胞的污染和损伤。

4. 荧光显微镜观察时，请使用UV激发光源，DAPI的荧光发射波长为461 nm。

5. 根据实际实验需求，可以将DAPI染料与其他荧光染料或抗体共染，以观察细胞核以外的其他细胞结构。

本操作教程仅供参考，实际实验操作请遵循实验室的标准操作规程和实验指导书。

鸣谢：https://www.abmole.cn/products/dapi-solution.html