甲氧基聚乙二醇醛基mPEG-CHO/甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺mPEG-MAL

使用单甲氧基聚乙二醇–醛修饰超氧化物歧化酶的可行性。方法：单甲氧基聚乙二醇–醛在弱酸性环境下(pH5.3)修饰超氧化物歧化酶生成schiff碱,再于同样环境下使用氰基硼氢化钠还原schi碱生成稳定的仲胺结构,利用SDS - PACE电泳对反应产物进行分子量鉴定。结果﹐单甲氧基聚乙二醇-醛可以成功修饰超氧化物歧化酶,耦联条件温和。结论﹐含醛基的化合物可以有效修饰蛋白质的氨基,建立了单甲氧基聚乙二醇–醛修饰超氧化物歧化酶的工艺。

实验方法

1.单甲氧基聚乙二醇–醛( mPEG-醛)修饰

soD将mPEG -醛与SOD按摩小比o手4℃环境盐缓冲液( pH 5.3),置于磁力现开上on的每L硼下反应24 h。加人摩尔比200倍于SOD的氰基硼氢化钠,置于磁力搅拌仪上,在4℃环境下继续搅拌24 h。产物在蒸馏水中使用MWo一浓缩后.所析24 h,每隔4h换1次水。用聚乙二醇浓缩后,所得溶液作为供试液。称取50 mg sOD,溶于5 ml蒸馏水中,得浓度10 mg/ml的SOD对照品液。

2.样品的制备取供试液15 Jl,SOD对照品

液15 ul,分别与等体积的2×电泳缓冲曹晚合已置于沸水浴中加热3 min,得到样的浴版以应戏很公溶液。取蛋白Marker 5 ul,与等体积的蒸馏水混合均匀,得 Marker。

3. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳惇分别取10 ul样品溶液、对照品溶液以及蛋白Marker 上样,初始电压 100 kV,染料进入分离胶后电压调至200 kV。经SDs -聚丙酰胺凝胶电泳(分离版.I12电泳5%)至染料到达距凝胶底部1 cm处时,停止电泳，取出凝胶。

产品名称：甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺

英文名称：mPEG-MAL

状态：固体/粉末/溶液

产品规格：mg

保存：冷藏

储藏条件：-20℃

储存时间：1年

用途：科研

温馨提醒：仅供科研，不能用于人体实验

产品名称：甲氧基聚乙二醇醛基

英文名称：mPEG-CHO

状态：固体/粉末/溶液

产品规格：mg

保存：冷藏

储藏条件：-20℃

储存时间：1年

用途：科研

温馨提醒：仅供科研，不能用于人体实验

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