细胞因子分析 - ELIspot

ELIspot 检测是检测外周血中抗原特异性反应数量的可靠方法。 对于 B 细胞、CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞，ELIspot 可以提供有关产生细胞因子的细胞数量的信息，而对于 B 细胞，我们还可以确定产生抗体的特定同种型。

为了同时测量 3 种细胞因子或 3 种抗体同种型，可以进行荧光斑点分析。 这提供了有关例如的信息。 多功能细胞（产生 2 种或多种细胞因子的细胞）的数量。

图1.ELIspot机制

细胞首先在抗体包被的表面上培养，无论是否存在目的抗原。 在这种培养过程中，一系列分泌的细胞因子被结合到培养表面的抗体捕获。 在预先指定的刺激期后，标记的检测抗体将通过酶促反应（用于单一检测）或荧光标记（当需要检测多种产品时）使捕获的细胞因子可视化。

使用 ELIspot 检测细胞因子产生的优势

• 高通量

• 坚固且准确（非常适合临床测试）

• 一次测试中最多三种细胞因子（使用 Fluorospot）

通过 ELIspot 检测细胞因子的示例

评估 PBMC 样本中抗原特异性 T 细胞的数量

图2.将 PBMC 解冻并静置过夜。 随后，用含有 CMV、EBV、流感和破伤风类毒素肽的 CEFT 肽库刺激细胞 16 小时。 之后，通过 ELIspot 评估 IFN-γ 的产生。 左图，未刺激和 CEFT 刺激孔的代表性图像，右图，在 CEFT 浓度增加时来自 2 个供体的 IFN-γ 产生细胞的汇编数据（每个条件重复 3 次，平均计数±标准偏差）。