CheKine 活性氧(ROS)检测试剂盒的操作步骤来啦
活性氧(ROS)参与许多退行性神经系统病症,如阿兹海默症、帕金森症、萎缩性脊髓侧索硬化以及年老或外伤导致的脑功能紊乱等。此外活性氧是植物体内正常代谢的信号小分子,在植物的生长发育和抗逆反应中具有重要作用。目前各领域中常见的四种ROS的检测分析方法有:化学发发光法、荧光探针法、分光光度法、电子顺磁共振法。

CheKine™ 活性氧(ROS)检测试剂盒提供了一种简单、灵敏、快速的ROS检测方法,其原理是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测。DCFH-DA(二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯)可自由透过活细胞膜进入细胞内,并被细胞内的酯酶水解,形成DCFH,DCFH无荧光且不能通透细胞膜,其可以被细胞内的活性氧(ROS)氧化生成有荧光的DCF,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测和观察活细胞内DCF的荧光信号强度,即可以分析细胞活性氧的水平。
操作步骤如下:
对于刺激时间较短(通常为2 h以内)的细胞,建议先装载探针,后用活性氧阳性对照或感兴趣的药物刺激细胞;对于需要较长时间刺激(通常为6 h以上)的细胞,建议先用活性氧阳性对照或感兴趣的药物刺激细胞,后装载探针。
1.原位装载探针 (仅适用于贴壁细胞)
2.收集细胞后装载探针 (适用于贴壁细胞和悬浮细胞)
3.荧光显微拍照
4.流式细胞分析操作方法
文章来源:http://www.abbkine.cn/reactive-oxygen-species-ros-detection