WB实验原理，WB实验步骤以及结果分析，本视频为直播回放视频，每周六实验讲座，周
2023-06-13 16:27 作者:caocaodala | 我要投稿
WB实验
作用：
1、定性（是什么蛋白）
2、半定量（相对定量，样本间量的比较）
原理：
采用聚丙烯酰氨（PAGE）凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体上（转膜），固相载体以非共价键形式吸附蛋白质作为抗原，与相应的抗体起免疫反应，再与酶（或同位素）标记的第二抗体起反应，经过底物显色（或放射自显影）以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。——1、抗原-抗体特异性结合
2、酶标记的二抗与底物反应显色
09:40
Maker：像尺子一样，衡量蛋白的分子量大小，出现显影可以判断目的蛋白表达了。
实验步骤：
1、收集蛋白样品（组织或细胞）
2、电泳（PAGE）
3、转膜
4、封闭：用脱脂奶粉结合膜上结合位点。便于一抗二抗孵育。
5、一抗孵育
6、二抗孵育
7、蛋白检测
条带分析：
ImageJ软件分析进行定量
WB的实验样本前处理、保存、运输：
