游离DNA的收集及高效利用

什么是游离DNA？

游离DNA (Cell-Free Circulating DNA；cfDNA)是指来自细胞凋亡或坏死，游离于细胞外的DNA片段，广泛存在于人类的血清、血浆、脑脊液、尿液或唾液当中，并会随组织损伤、癌症和炎症反应等发生浓度变化。

cfDNA可以作为一种预测疾病危险性的生物标志物，我们可以通过检测血浆/血清中游离DNA水平的动态变化来进行孕妇产前的筛查、诊断以及肿瘤等重大疾病筛查、治疗、预后监测等。

血液的核酸检测，尤其对血浆中的游离DNA（cfDNA）的检测，是现在诊断多种疾病的重要方法之一，例如在怀孕的母亲体内和肿瘤患者体内，会有部分的核酸片段来自于胎儿和肿瘤组织，通过检测这部分游离的核酸，可以了解胎儿的基因性状和肿瘤患者的患病情况，为相关检测提供无创的诊断，例如胎儿的部分先天性基因疾病、肿瘤患者的基因突变情况等。

游离DNA如何获取？

在常规的血液保存条件下，新鲜血液的采集、存储和运输过程中，血液中的有核细胞易破碎释放出基因组DNA及其他成分，导致血浆中的靶标游离DNA被稀释，或者受到核酸酶介导的降解等情况，让检测的结果准确性降低，该问题也是影响血液核酸检测准确性的重要原因之一。

游离DNA在血液中不仅丰度低，而且稳定性差、完整度低。在健康人的血浆中，游离DNA含量的典型范围是1-10 ng/mL；其中胎儿游离DNA（cffDNA）仅占血浆游离DNA总量的5% -30%；循环肿瘤DNA（ctDNA）占整个cfDNA的0.01-1%（早期），中晚期时可达40%以上。

既然我们知道游离DNA的含量度如此低，那又该如何将核酸提取发挥到最大效益呢？要想获得高质量的游离DNA，那就需要从样本的收集，源头上保存和运输开始把控。