Blyscan染料助攻艾美捷sGAG检测试剂盒!
硫酸氨基葡萄糖 Glucosamine Sulfate,用于预防和治疗各种类型的骨性关节炎,如膝关节、髋关节、脊柱、肩、手、手腕和踝关节等部位的及全身性的骨性关节炎。本药可直接抗炎,缓解骨性关节炎的疼痛症状,改善关节功能,并阻止骨性关节炎病程的发展。且不会出现因前列腺素受抑制而引起的不良反应。
接下来小编给大家说的这个艾美捷sGAG检测试剂盒——专门用于检测样本中的硫酸氨基聚糖,它采用常规生化方法,通过标准曲线和比色,可定量分析总硫酸化多糖(氨基聚糖和蛋白聚糖)的含量,亦可测定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料,它可以特异性的与氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖组分结合,该方法不适于检测已经降解的硫酸化双糖片段。
艾美捷sGAG检测试剂盒的特点:
可检测广泛的蛋白多糖,可检测的氨基多糖包括硫酸软骨素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、硫酸肝素,不适合检测包含海藻酸的样品,因为它们含有糖醛酸。该试剂盒也不能对透明质酸定量,但透明质酸并不会对硫酸化氨基多糖的检测产生干扰。细胞培养基中20%的胎牛血清也不会干扰实验。该方法检测灵敏度为5ug,所需时间为1小时。
艾美捷sGAG检测试剂盒检测样本:
可来自软骨组织、动脉组织、肺组织、皮肤组织、肿瘤组织、细胞核组织提取物、细胞培养液、羊水和尿液
Blyscan检测流程图:

艾美捷sGAG检测试剂盒实验步骤 :
1. 绘制标准曲线
2. 待测样品的处理:
取50ul待测样品进行实验。如果反应物在656nm初的吸收峰大于1.5,则对样品进行稀释,待测样样品浓度落入标准曲线中段时,准确度较高。
3. 硫酸氨基聚糖—染料复合物的获得
加1.0ml的Blyscan染料溶液到待测样本中,充分混匀,待不溶物出现,离心,弃上清,则获得紫色的硫酸氨基聚糖—染料复合物
4. 硫酸氨基聚糖—染料复合物中染料的释放
加入1.0ml的染料释放剂,充分混匀。溶解5min以上,使染料充分释放
5. 测定
用分光光度计于波长656nm处测定,或使用colorimeter红色滤光片测定
sGAG检测试剂盒已发表文章,超500篇,仅摘录展示部分:
1、Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.com.
2、Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia and lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.
3、Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. and Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794
4、Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. and Ott,H.C. (2013) Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.