浅谈提取RNA常见误解|杭州昊鑫

提取RNA常见误解（之一）

误认为RNA提取一定要4度离心。离心柱提取，上离心柱也用4度离心。其实这是错误的。4度离心只有坏处，没有好处。

提取RNA常见误解（之二）

误认为提取RNA/DNA不用跑电泳，只要测OD吸光值/OD比值就可以知道浓度和纯度。核酸纯化，大家最大的误解，就以为测出来OD值吸光值就是测出来了核酸的浓度，这个概念大错特错了。测OD值，只是测总吸光值，它不能等同于测的是真实核酸浓度。总吸光值可以来源于真正的核酸，也包含来源于残留的杂质，残留的蛋白，残留的降解的RNA/DNA，它们都有吸光值，所以测量的总吸光值OD值换算的浓度，不代表这都是纯核酸的浓度，也可能包含了来源于残留的杂质，降解的RNA，残留的蛋白等等的吸光值换算的浓度。这当然不是真正的纯核酸的浓度。只有在你提供的核酸(RNA,DNA)是100%纯的时候，测量的OD值浓度才是真正能100%换算成核酸浓度。 举个例子，我给你一个完全降解的RNA，你去测量OD值吸光值，它的吸光值也会很高，机器把吸光值换算成的浓度很高，但是这个你能用吗？RNA已经完全降解了，跑电泳啥也没有。 再举个例子，你提取DNA完全失败了（完全没提取到DNA），但是里面残留了一堆的蛋白杂质和降解的RNA片段,你去测量吸光值OD值，也非常的高，机器换算成浓度也非常高。但是你能说你提取成功了DNA么？ 你跑电泳一看，啥DNA条带也没有，只有前面残留一堆的降解的RNA片段。