5-FITC Biotin,CAS:134759-22-1,荧光素标记的生物素
FluoresceinBiotin是一种放射性生物素的替代品，它可以通过荧光或吸光度来检测和量化生物素结合Chemicalbook位点；一经与抗生物素蛋白(avidin)或链霉亲和素(streptavidin)结合，荧光或吸光度就淬灭。
5-FITC Biotin，CAS号：134759-22-1 物理性质：
英文名：5-FITC Biotin
英文名称：Fluorescein biotin [5-((N-(5-(N-(6-(biotinoyl)amino)hexanoyl)amino)pentyl)thioureidyl)fluorescein]
中文名：
5-FITC-生物素
荧光素-生物素
5-荧光素-生物素
5-荧光生物素
5-异硫氰酸荧光素-生物素
CAS号：134759-22-1
分子式：C42H50N6O8S2
分子量：831.02
纯度：95%
外形：Orange Yellow Solid
熔点 >164°C (dec.)
存储条件：-20℃，阴凉，干燥，通风良好的库房
包装规格：1g、5g、25g等
注意事项：取用时一定要干燥，避免频繁解冻和冷冻。
溶解性：溶于大部分有机溶剂，溶于水
相关类别:荧光探针，标记，颗粒和染色;荧光染料
产品：可定制
相关介绍：
荧光素标记的生物素(FITC-Biotin)操作步骤：
(一)获得目的基因
1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。
2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。
(二)构建重组表达载体
1、荧光素标记的生物素(FITC-Biotin)载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。
2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。
(三) 获得含重组表达质粒的表达菌种
1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。
2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。
3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。
(四)诱导表达
1、 荧光素标记的生物素(FITC-Biotin)挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。
2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。
3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。
4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。
5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。
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对于 5-FITC Biotin的内容相信大家应该有所了解了吧，如果对于产品方面还有相关疑问的话，欢迎进行留言，会为大家进行答疑解惑！
【温馨提示】：供应的5-FITC Biotin用于科研，不能用于人体治疗、药物开发、和其他商业用途，如有购买方或第三方采购我公司的5-FITC Biotin用于治疗、药物开发或商业用途，购买方或第三方将承担所有法律责任，我公司也将追究其法律责任。（2022.7.21）
