不同种类的PCR探针如何工作-QZyme™ 探针

QZyme™ 是一种标记探针系统，用于在 qPCR 中靶向特定序列。 该探针使用脱氧核酶来切断报告基因和猝灭剂之间的连接，并在探针与目标序列杂交后发出荧光。 它包含三个组件，如通用寡核苷酸底物 (UOS)、目标特异性反向引物 (TRP) 和催化 DNA 结构序列 (SCD)。

通用寡核苷酸底物 (UOS)：用于催化 DNA 的序列。 它包含荧光报告分子和紧邻淬灭荧光的淬灭剂。

目标特异性反向引物 (TRP)：用作催化 DNA 模板的序列。

催化 DNA 结构 (SCD) 的序列：无活性且以反义方式起作用的序列。 催化 DNA 结构是脱氧核酶。

图 1. QZyme™ 探针由通用寡核苷酸底物、目标特异性反向引物和催化 DNA 结构序列组成。

QZyme™ PCR 探针如何工作？

催化 DNA 结构引物的序列在第一个扩增循环中得到延伸，其产物在第二个扩增循环中用作模板。

目标特异性反向引物以催化DNA结构产物的序列为模板进行延伸，生成含有活性催化DNA区域的新产物。

通用寡核苷酸底物与目标特异性反向引物产物杂交，在 DNAzyme 的帮助下在下一步退火步骤中将其切割。

这种裂解将淬灭剂与报告分子分开，游离的报告分子可以发出荧光。

图 2. QZyme™ 探针与目标序列结合。 反义序列得到延伸，激活通用寡核苷酸底物。 探针被切割后，报告基因游离并发出荧光。