载BMP-2,VEGF和TGF-β壳聚糖纳米水凝胶缓释系统/聚多巴胺功能化壳聚糖水凝胶

今天瑞禧生物小编给大家整理分享的内容是负载BMP-2,VEGF和TGF-β的壳聚糖纳米水凝胶缓释系统/聚多巴胺功能化壳聚糖水凝胶的研究制备方法，和小编一起来看！

负载BMP-2,VEGF和TGF-β的壳聚糖纳米水凝胶缓释系统制备方法:

采用离子交联法制备负载BMP-2,VEGF或TGF-β的壳聚糖纳米缓释微球,利用壳聚糖制作温敏性微孔水凝胶,将负载生长因子的纳米缓释微球包裹入水凝胶内,制备出负载BMP-2,VEGF和TGF-β壳聚糖纳米微球水凝胶双重缓释系统.体外培养小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1),第一阶段实验以成骨诱导培养基(oeteogenic medium,OM)中添加BMP-2,VEGF和TGF-β的不同组合方式设计实验分组,以单纯OM培养基为对照组;第二阶段实验以OM培养基中添加不同组合的负载BMP-2,VEGF和TGF-β的壳聚糖纳米缓释系统设计实验分组,以单纯O M培养基为对照组.使用电镜,粒度仪及Elisa试剂盒等分析纳米微球粒径,形态和释放曲线等.

采用CCK-8实验检测细胞的体外增殖能力,成骨效果检测采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及其活性定量检测,茜素红染色和矿化沉积定量分析4种方法.采用RT-PCR检测成骨相关基因RUNX2,ALP和OCN的表达情况,Western blot检测成骨诱导相关信号通路的表达.

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