TMEM25基因——三阴性乳腺癌靶向治疗潜在靶点

       三阴性乳腺癌（TNBC）是指雌激素受体、孕激素受体和原癌基因Her-2的癌组织免疫组织化学检查结果为均为阴性的一种乳腺癌亚型。TNBC占所有乳腺癌类型的10.0%～20.8%，预后极差，被称为“乳腺癌之王”。

       前人研究发现，单跨膜蛋白TEME25为乳腺癌患者有利的预后和预测标志物，然而其分子机制尚不清楚[1]，因此，研究TMEM25相关机制有望日后将其应用于TNBC的靶向治疗。

       厦门大学和复旦大学附属中山医院的研究者们先是采用人乳腺癌细胞MDA-MB-231和鼠乳腺癌细胞4T1检测了TMEM25表达对TNBC细胞生长速率的影响，之后通过CRISPR基因编辑技术对TMEM25基因进行敲除和过表达，以研究TMEM25在调节TNBC进展中的作用。结果显示，敲除TMEM25基因可以显著促进MDA-MB-231和4T1细胞的生长，而过表达TMEM25则显著抑制了细胞生长(图1)。后续，研究者们通过免疫印迹实验进一步证实了这一结果。同时，这也表明了TMEM25在TNBC靶向治疗中的巨大潜力。

       此外，在这项研究中，研究人员还发现TMEM25的缺失将通过激活EGFR/STAT3信号通路来促进细胞生长或存活，这可能在TNBC的发展中发挥关键作用。该结果表明，TMEM25可以作为一种肿瘤抑制因子抑制TNBC的进展[2]。

       CRISPR/Cas9是一种可以对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，被广泛应用于基因治疗、病毒防治和工业生产等，具有十分可观的研究进展和应用前景。基于CRISPR/Cas9，Ubigene研发了CRISPR U™基因编辑技术，相比传统方法，该技术将基因编辑效率提升了10-20倍，可轻松实现基因敲除、敲入、点突变及过表达等。利用CRISPR U™技术，Ubigene已成功构建MDA-MB-231、4T1、MDA-MB-468、MCF7、JIMT-1以及HCC1806等乳腺癌相关的基因编辑细胞株。

       若想采用CRISPR U™进行基因敲除，Ubigene可以根据具体需求，结合基因及细胞情况，提供3套方案：

       1、小片段敲除，gRNA设在外显子2两端的内含子中，敲除外显子编码碱基数为非3倍数，敲除后可造成移码。

       2、移码敲除，gRNA设在外显子上，缺失的碱基数为非3倍数，敲除后可发生移码突变。

       3、大片段敲除，将整个基因的编码序列敲除，达到大片段敲除的效果。

参考文献：

[1] Doolan, P. et al. TMEM25, REPS2 and Meis 1: favourable prognostic and predictive biomarkers for breast cancer. Tumour Biol. 30, 200–209 (2009).

[2] Bi J, Wu Z, Zhang X, et al. TMEM25 inhibits monomeric EGFR-mediated STAT3 activation in basal state to suppress triple-negative breast cancer progression[J]. Nature Communications, 2023, 14(1): 2342.