国自然热点——线粒体——如何设计实验?

线粒体是细胞内的重要细胞器之一,其功能异常与多种疾病有关,近几年,线粒体方向也一直是国自然的热点。那么线粒体方向的课题能做哪些实验呢?今天小薇先带大家了解一些入门级的线粒体实验
检测线粒体形态和数量
采用线粒体特异性荧光探针或电子显微镜方法对不同处理下的细胞中线粒体结构和数量进行评价。

检测线粒体功能
1)检测线粒体ATP产生水平、膜电位等功能[1-3];





2)测定线粒体内Ca2+、ROS等含量[1-3];



3)通过检测线粒体分泌的因子来评估线粒体机能[3];

测定药物/技术对线粒体的影响
测定药物或治疗技术对线粒体形态、数量、功能等指标的改善效果。
分析线粒体基因调控的作用
利用RNAi或基因编辑等技术改变线粒体或调节线粒体相关蛋白,并研究对细胞生长、凋亡、代谢以及响应外部刺激的影响。
以上是一些线粒体实验设计建议,此外,线粒体还可以和内质网、Ca2+通道等结合设计相关实验,小薇后边会慢慢给大家介绍,关注小薇,科研路上不迷路。有想设计课题但是又无从下手的小伙伴欢迎咨询小薇哦~
参考文献
1. Xu, Y., et al., Tolerance to endoplasmic reticulum stress mediates cisplatin resistance in human ovarian cancer cells by maintaining endoplasmic reticulum and mitochondrial homeostasis. Oncol Rep, 2015. 34(6): p. 3051-60.
2. Jin, Y., et al., Ginsenoside Rh1 prevents migration and invasion through mitochondrial ROS-mediated inhibition of STAT3/NF-κB signaling in MDA-MB-231 cells. International journal of molecular sciences, 2021. 22(19): p. 10458.
3. Shi, H., et al., Inhibition of ACSF2 protects against renal ischemia/reperfusion injury via mediating mitophagy in proximal tubular cells. Free Radical Biology and Medicine, 2023. 198: p. 68-82.