单克隆抗体考点题型总结—高考就这么出~ 【选必三】|考点精华
喵喵 | 2-6 单克隆抗体制备
1️⃣原理基础题
2022·山东
如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是
A. 双抗可同时与2种抗原结合
B. 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C. 筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D. 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞【浆细胞只能产生1种抗体】
2020·北京
人体感染新冠病毒后，机体会产生多种特异性抗体。我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列，构建表达载体并在相应系统中表达，可制备出全人源单克隆抗体。以下表述错误的是
A. 该单抗可直接用于新冠病毒的核酸检测【单抗找的是抗原，没有办法跟核酸结合】
B. 在该单抗制备过程中利用了基因工程技术
C. 该单抗可与新冠病毒相应蛋白特异性结合
D. 可用抗原–抗体反应检测抗体基因表达产物
2021·山东
一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是
A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大【小；多抗如果抗原纯度低，就缠在多抗里。单抗需要多次提取】
B. 单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合【多种B淋巴细胞】
C. 利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗【很多种单抗】
D. p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况✓
2️⃣两次筛选题型
2017秋·东城区期末
若用a表示骨髓瘤细胞，b表示B淋巴细胞，则单克隆抗体制备过程中的两次筛选可表示为
A. A
B. B
C. C
D. D✓
2022春·浦口区校级期中
如图，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。下列关于筛选原理的叙述，正确的是
A. 免疫的B淋巴细胞及其相互融合细胞因全合成途径被A阻断，在HAT培养基上不能增殖【通过补救合成路径增殖】
B. 骨髓瘤细胞及其相互融合细胞因无法进行上述两个途径，而在HAT培养基上不能增殖✓
C. 杂交瘤细胞因为可进行上述两个途径，能在HAT培养基上大量增殖【杂交瘤细胞加入A，被阻断了，只能进行下面的途径】
D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞，既能大量增殖又能产生较高纯度的目标抗体【得到了多克隆抗体，还要进行第二次筛选】
3️⃣综合大题
2020·新课标Ⅰ
为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：
（1）上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是注射抗原，促进小鼠产生具有特异性的B淋巴细胞。
（2）写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：从小鼠甲内抽取脾脏，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。
（3）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于选择培养基，使用该培养基进行细胞培养的结果是筛选出由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的杂交瘤细胞。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是抗体-抗原特异性结合。
（4）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有将杂交瘤细胞注入小鼠细胞腹腔进行培养或在体外进行大规模培养。
2020·江苏
新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。图1为病毒侵入后，人体内发生的部分免疫反应示意图。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图2为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题：
（1）图1中人体内抗原递呈细胞吞噬病毒,并将病毒的抗原暴露在细胞表面，被T细胞表面的受体识别后激活该细胞。
（2）B细胞识别入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，经过细胞的增值、分化，形成浆细胞和记忆细胞。
（3）为判断疑似患者是否为新型冠状病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的核酸；采集血液样本主要用于血清学检查，检测抗新型冠状病毒抗体。
（4）据图2所示，研制抗S蛋白单克隆抗体，需先注射刺突蛋白（或S蛋白）免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞，再提取激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基筛选获得杂交瘤细胞。因为同一种抗原可能激活多种B细胞，还需继续筛选才能获得分泌单克隆抗体的细胞株。
2021·湖南
M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA 的工具酶是限制酶，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是清除代谢杂物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，及时补充营养物质。
（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为细胞体积小，细胞核大，核仁明显，功能上具有发育的全能性。
（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路：取克隆动物A的肝脏细胞，提取蛋白质，与M蛋白的单克隆抗体进行抗原-抗体杂交，若出现凝集反应，则说明M基因未失活，反之则失活。
